兔抗小麦钙调素抗血清的制备及其纯化.pdfVIP

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2015-07-24 发布于重庆
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兔抗小麦钙调素抗血清的制备及其纯化.pdf

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兔抗小麦钙调素抗血清的制备及其纯化.pdf

第 31 卷第 6 期河北农业大学学报 Vol. 31 No. 6 2 0 0 8 年 1 1 月 JOURNAL OF AGRICUL TURAL UNIVERSITY OF HEBEI 　　 Nov . 2 0 0 8 ( ) 文章编号 : 1000 - 1573 2008 06 - 0055 - 04 兔抗小麦钙调素抗血清的制备及其纯化① 黄　晨 , 　侯春燕 , 　王冬梅 (河北农业大学生命科学学院 , 河北保定 071001) 摘要 : 为制备兔抗小麦钙调素抗血清并对其进行纯化 ,首先从小麦叶片中提取钙调素蛋白,对其初步纯化后免疫家兔 , 制备得到兔抗小麦钙调素抗血清 ,再以大肠杆菌中诱导表达的拟南芥钙调素蛋白作为抗原 ,利用 PVDF 膜结合法纯化得到了兔抗小麦钙调素抗血清 ,并通过 Western Blotting 对所纯化的多克隆抗体进行了鉴定。关　键　词 : 钙调素 ; 多克隆抗体 ; 纯化 ; Western Blotting 中图分类号 : Q 942. 6 文献标识码 : A Preparation and purif ication of rabbit antiwheat calmodulin antiserum HUANG Chen , HOU ChunYan , WANG Dongmei (College of Life Science ,Agricultural University of Hebei ,Baoding 071001 , China) Abstract : To prepare and purif y rabbit antiwheat calmodulin antiserums , calmodulin protein was extracted from wheat leaves for immuned rabbits after preliminary purification. Then A rabidopsis thaliana calmodulin protein was used by E . coli induced expression as antigen to purif y rabbit anti wheat calmodulin antiserum by PVDF membrane binding. The purified polyclonal antibody was i dentified by the Western Blotting. Key words : calmodulin ; polyclonal antibody ; purification ; Western Blotting ( ) 2 + ( ) 　　钙调素 Calmodulin ,CaM 作为 Ca 的多功能受 CaM 分子量小 17 kD ,在进化上高度保守 ,使其免疫体蛋白在钙信号系统中发挥着重要作用 ,因此 Ca2 + / 源性较弱 ,难于制备高效价抗体。本研究以初步纯化 CaM 是目前植物细胞信号系统中研究得最为深入和