嗜水气单胞菌温敏胞外蛋白酶基因eprJ的克隆与检测.pdfVIP

嗜水气单胞菌温敏胞外蛋白酶基因eprJ的克隆与检测.pdf

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嗜水气单胞菌温敏胞外蛋白酶基因eprJ的克隆与检测.pdf

第 卷第 期 中 国 水 产 科 学 6 ? PJEA6 +JA? 年 月 !##? (JMQGEJVYHO’DQ @KHDKDOJV-’HG +JZDF/DQ !##? I !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 嗜水气单胞菌温敏胞外蛋白酶基因!#$的克隆与检测 任 燕,陆承平,姚火春 (南京农业大学 农业部动物疫病诊断与免疫重点实验室,江苏 南京 ) !##$% 摘要:根据已发表的人源嗜水气单胞菌( , )温敏胞外蛋白酶基因 的核甘酸序列,设计合成 !#$%$’()+#$)-.’ ’ #! * , , 一对引物,以嗜水气单胞菌鱼源株 基因组 为模板,通过 扩增得到 的胞外蛋白酶基因 ,将 ’() *+ ,-. ##%/ #/ 0 , 该基因片段连接到 1*2)3载体中,构建克隆载体 1*) 。序列分析发现,其与发表的 的胞外蛋白酶 0 0 #/ ’4 , 基因的同源性有 。根据测序结果在保守区重新设计一对引物以增强特异性,扩增片段大小为 。对 #! $5 627/ , 0 年 年间从浙江、福建、湖北及江苏等地不同患病水产动物肝肾等脏器分离到的 株 检测结果显示, $$#!!##8 % !6 ’ 从中国东南地区分离的 株 水生动物致病性菌株扩增均为阳性,株 非致病性菌株为阴性,推测该基因普遍存 ! ’ ! ’ 在于致病性 中。检测模板 的灵敏度可达 ;6 / 。[中国水产科学, , (): ] ’ *+ 9%:# !##?6? $!8;$!2 = 关键词:嗜水气单胞菌;温敏胞外蛋白酶基因;克隆与检测 中图分类号: 文献标识码: 文章编号: ( ) @$8 ##%;2767; !##?#?;#$!8;#% 嗜水气单胞菌( , )是 在情况,探讨应用 技术检测 的方法及其灵 !#$%$’()+#$)-.’ ’ ,-. ’

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