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嗜水气单胞菌温敏胞外蛋白酶基因eprJ的克隆与检测.pdf
第 卷第 期 中 国 水 产 科 学
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年 月
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嗜水气单胞菌温敏胞外蛋白酶基因!#$的克隆与检测
任 燕,陆承平,姚火春
(南京农业大学 农业部动物疫病诊断与免疫重点实验室,江苏 南京 )
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摘要:根据已发表的人源嗜水气单胞菌( , )温敏胞外蛋白酶基因 的核甘酸序列,设计合成
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一对引物,以嗜水气单胞菌鱼源株 基因组 为模板,通过 扩增得到 的胞外蛋白酶基因 ,将
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0 ,
该基因片段连接到 1*2)3载体中,构建克隆载体 1*) 。序列分析发现,其与发表的 的胞外蛋白酶
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,
基因的同源性有 。根据测序结果在保守区重新设计一对引物以增强特异性,扩增片段大小为 。对
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年 年间从浙江、福建、湖北及江苏等地不同患病水产动物肝肾等脏器分离到的 株 检测结果显示,
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从中国东南地区分离的 株 水生动物致病性菌株扩增均为阳性,株 非致病性菌株为阴性,推测该基因普遍存
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在于致病性 中。检测模板 的灵敏度可达 ;6 / 。[中国水产科学, , (): ]
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关键词:嗜水气单胞菌;温敏胞外蛋白酶基因;克隆与检测
中图分类号: 文献标识码: 文章编号: ( )
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嗜水气单胞菌( , )是 在情况,探讨应用 技术检测 的方法及其灵
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