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2013人教版选修一课题2《土壤中分解尿素的细菌的分离与计数》ppt课件2.ppt
专题二 微生物的培养与应用 课题2 土壤中分解尿素细菌的 分离与计数 课题背景 尿素是一种重要的农业氮肥,尿素并不能直接被农作物吸收。只有当土壤中的细菌将 之后,才能被植物利用。土壤中的细菌之所以能分解尿素,是因为他们能合成 。 研究思路 1、选择培养基:在微生物学中,将允许特定种类的微生物生长,同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基,称作 。 2、筛选尿素分解菌的选择性培养基以 为唯一氮源 。 实验设计 1、土壤取样: 土壤中的微生物,大约70%~90%是细菌,细菌适宜在酸碱度接近 的潮湿土壤中生长 ,绝大多数细菌生活在距地表 的土壤层。 2、样品的稀释: 测定土壤中细菌的数量,一般选用 。 测定放线菌的数量,一般选用 。 测定真菌的数量,一般选用 。 课题延伸 原理:尿素分解菌合成的 可以将尿素分解成 ,会使培养基的碱性增强。因此,可通过检测培养基 变化来鉴定该种细菌能否分解尿素 方法:以尿素为唯一氮源的培养基中入 ,如果pH升高,指示剂将变 。 * (一)筛选菌株 (二)统计菌落数目 1、测定微生物数量的常用方法有 和 。 2、稀释涂布平板法统计样品中活菌的数目的原理 当样品的稀释度足够高时,培养基表面生长的一个菌落,来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数,就能推测出样品中大约含有多少活细菌。为了保证结果准确,一般设置 个平板,选择菌落数在 的平板进行计数,并取平均值。统计的菌落数往往比活菌的实际数目 。 (三)设置对照 设置对照的主要目的是排除实验组中 对实验结果的影响,提高实验结果的可信度。 3、微生物的培养与观察 不同种类的微生物,往往需要不同的培养温度和培养时间。 细菌 。 放线菌 。 霉菌 。 每隔 统计一次菌落数目,选取菌落数目稳定时的记录作为结果,这样可以防止因培养时间不足而导致一楼菌落的数目。一般来说,在一定的培养条件下(相同的培养基、温度及培养时间),同种微生物表现出稳定的 。这些特征包括 。 菌落数量的估算: 计算每克样品中的菌落数= 。 其中,C代表 , V代表 , M代表 。 操作提示 1、无菌提示: (1)取土样用的小铁铲和盛土样的信封在使用前都需要灭菌。 (2)应在火焰旁称取土壤。在火焰附近将称好的土样倒入锥形瓶中,塞好棉塞。 (3)在稀释土壤的过程中,每一步都在火焰旁操作。 2、做好标记 3、制定计划
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