带有氯霉素抗性基因标记的重组布氏杆菌S2的构建和其生物学特性.pdfVIP

卷 期 ! # 微 生 物 学 报 !（）： # ’( ) ’( 年 月 日 $%% $ ! !#$ %’()(*(+$ ,-$ ! *+,+-.+/ $%% !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 带有氯霉素抗性基因标记的重组布氏杆菌! 的构建及其生物学特性 毛开荣，丁家波，程君生，蒋玉文，姚文生 （中国兽医药品监察所 北京 %%%(） 摘 要：无法区分免疫接种和自然感染是限制布氏杆菌疫苗应用的主要原因。本研究通过基因同源重组技术，用 氯霉素抗性基因（ # ）替代布氏杆菌弱毒 株的 基因，筛选获得重组布氏杆菌 株。试验发现，重 ! A$ $%! /A$4B.:C 组菌 由原先的光滑型转变成粗糙型。 在 培养基上传 代后仍能稳定表达氯霉素抗性蛋 /A$4B.:C /A$4B.:C 2AD $0 白。小鼠动物试验模型表明， 与 有相似的保护性，但 比 具有更高的安全性。 免疫小鼠 /A$4B.:C A$ /A$ A$ /A$4B.:C 后，其抗血清可通过平板凝集试验与 免疫的血清相区分。本研究为布氏杆菌标记疫苗的研制提供了技术平台。 A$ 关键词：布氏杆菌；氯霉素抗性基因； 基因；标记疫苗 B.:C 中图分类号： 文献标识码： 文章编号： （ ） E(# D %%%4#$%’ $%% %#4%’(4%! 布氏杆菌病（布病）是由布氏杆菌（ ）引 徐福洲博士提供。昆明系小白鼠购自北京通利华实 ’#()*++, 起的以流产和发热为特征的人兽共患病，严重地威 验动物技术有限公司。 胁着人和多种动物的生命健康。布氏杆菌具有细胞 主要试剂和仪器： 、 、 #$ #$ FHC( ICJ K8L 2! *MD 内寄生的特点，人感染布氏杆菌后，需要长时间的抗 连接酶、各种限制性内切酶等均购于 27K7J7 公司 ［］ 生素治疗，而且往往会留下严重的后遗症 。因此 （大连）；细菌基因组提取试剂盒（ ： ）购自 N9L ($($