抗体应用2010-9-13.pptVIP

抗体的应用 免疫教研室 刘北一 beiyi@ 鼠源性单抗存在的问题与解决的思路 ◆ 异种蛋白反应:可引起抗同种型抗体产生.由此可导致: [1] 迅速中和再次进入的抗体,使治疗无效; [2] 超敏反应. ◆ 穿透力差: 影响治疗及免疫组化结果；原因：分子量大 ◆ 外源性Ig的体内半衰期较短； ◆ 特异性差或过于单一； ◆ 生产过程较长； ◆ 价格昂贵； ◆ 应用范围有限。 ◆ 单抗技术的改进； ◆ 人源化单抗的研制 : 人-鼠杂交瘤, 人-人杂交瘤； SCID鼠的应用；XenoMouse的制备；异源性抗体的改 造 ；全人抗体。 ◆ 基因工程抗体:可解决抗体的人源化及减低分子量. ◆ 新效能抗体:抗体融合蛋白,双功能抗体,抗体酶 ◆ 细胞内抗体的研制； ◆ 抗体库的建立； ◆ 抗体药物的研制； ◆ 抗体制备的产业化； ◆ 抗体应用范围的拓展。  克隆编码抗体的基因 ( 传统的方法, PCR ) 适合的载体 (病毒, 质粒, 噬菌体) 表达体系 (转染瘤, 昆虫, 大肠杆菌, 酵母菌, 植物) 产物 纯化 * * 幻灯片由富宁教授提供 诊断： 已知抗体查未知抗原；血型、乙肝、SARS、肿瘤相关抗原等 已知抗原查未知抗体；HIV、伤寒、自身免疫病等 预防： 应急预防（破伤风，Rh不合的新生儿溶血等） 治疗： 感染、抗移植排斥、抗炎、抗肿瘤 科研： 提取、纯化、鉴定、分析 存在的问题 (二) 解决问题的思路 基因工程抗体— 免疫球蛋白分子上的星球大战 原 理 应用DNA重组和蛋白质工程技术,在根据需要基因水平上对Ig分子进行切割、拼接或修饰，重新组装成的新型抗体分子。 种 类 基本结构 相对分子量（kDa） 鼠源性成分 人-鼠嵌合抗体 鼠源V区或Fab 150 25-30% 人源C区或Fc 改型抗体 以鼠源CDRs 150 15% 替换人源CDRs 双特异性抗体 异源性H2/L2 150 － 小分子抗体 Fab 完整L和部分H 50 15％ Fv VH和VL 25 15％ 单链抗体 VH－连接肽－VL 26 15％ 单域抗体 VH 12.5 7.5％ 最小识别单位 单一CDR ? 2 ?1.5％ 基因工程抗体的种类及其特性 重构型抗体 CDR植入 90％人源 嵌合抗体 66％人源 全鼠源 全人抗体 体外 抗体库 转基因人-鼠杂交瘤 小鼠杂交瘤 小分子抗体及多聚抗体 分子量仅为天然抗体分子的1/6，穿透力强； 免疫原性明显减弱；在血清内清除过快 抗体市场 治疗性抗体 300亿美元 2008 【中国1亿人民币】 诊断抗体 80亿美元 2008 研究用抗体 20亿美元 2008 (FDA Fast Track) FDA 较快程序 Paradigm for Biomarker identification 生物标记鉴定规范 Stable,