微生物的培养与利用.ppt

四、菌种的保藏 1.斜面保藏 临时保存 2.甘油保藏 长期保存 3、某种微生物数量的测定 生长：个体体积的增加 繁殖：个体生长到一定阶段，通过特定方式产生新 个体，即引起生命个体数量增加的生物学过程。 在微生物学中提到的“生长”，一般均指群体生长，这一点与 研究大生物时有所不同。 细菌太小，往往讨论其群体生长。 （一）微生物生长概述 1、稀释平板计数法 对样品进行适当稀释 → 单个微生物在适宜的固体培养基表面或内部生长、繁殖 → 肉眼可见的菌落 → 对菌落数目的计数推测样品中的微生物细胞数 （二）以数量变化对微生物生长情况进行测定 同一稀释度三个以上重复,取平均值； 每支移液管及涂布器只能接触一个 稀释度的菌液； 样品充分混匀； 每个平板上的菌落数目合适，便于 准确计数； 要求： 每克样品中的菌株数=（C/V）* M 2.显微镜直接计数法 采用细菌计数板或血球计数板，显微镜下直接计数 （计算一定容积里样品中微生物的数量）。 取清洁无油的血球计数板，在计数室上面加盖血盖片。 取酵母菌液，摇匀，用滴管由盖玻片边缘滴一小滴，使菌液自行渗入，计数室内不得有气泡。 用10×镜观察并将计数室移至视野中央。 在10×镜下计数：计数4个（或5个）中格的平均值，然后求得每个中格的平均值。乘上16（或25）就得出计数区总菌数，最后再换算到每mL菌液中的含菌数。 注意事项：计上不计下，计左不计右。出芽计一半 必修3P68 显微镜直接计数法缺点： 不能区分死菌与活菌； 不适于对运动细菌的计数； 需要相对高的细菌浓度； 个体小的细菌在显微镜下难以观察； ?? 课题名称 实验仪器和设备 ?? 实验试剂或药品 说明 微生物的实验室培养 培养皿、试管、锥形瓶、量筒、酒精灯、电子天秤、高压蒸汽灭菌锅、移液管、接种环、涂布器、恒温箱、干热灭菌箱、小铁铲等 ? ? 牛肉膏、蛋白胨、氯化钠、盐酸、氢氧化钠、琼脂等 干热灭菌箱能够迅速地将洗干净的培养皿和试管烘干，小铁铲用于铲土 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 除配制牛肉膏蛋白胨培养基所需物质外，增加KH2PO4 、NaHPO4、MgSO4·7H2O、葡萄糖、尿素、酚红等 分解纤维素的微生物的分离 除配制牛肉膏蛋白胨培养基所需物质外，增加纤维素、NaNO3、Na2HPO4·7H2O、KH2PO4、KCl、酵母膏、水解酪素、CMC-Na(羧甲基纤维素钠)、土豆汁、刚果红等 土壤取样 选择培养（此步是否需要，应根据样品中目的菌株数量的多少来确定） 梯度稀释 将菌悬液涂布到有特定选择作用的培养基上 挑选单菌落 发酵培养 土壤中某样品细菌的分离与计数流程图表示如下： （09宁夏理综）32．生物选考题 A．[生物———选修I生物技术实践] 某小组同学为了调查湖水中细菌的污染情况而进行了实验。实验包括制备培养基、灭菌、接种及培养、菌落观察计数。请回答与此实验相关的问题。 （1）培养基中含有的蛋白胨、淀粉分别为细菌培养提供了___ 和_____ 。除此之外，培养基还必须含有的基本成分是____ 和 ____。 （2）对培养基进行灭菌，应该采用的方法是____ __ _。 碳源 氮源 无机盐 高压蒸汽灭菌 水 （09宁夏理综）32．生物选考题 （3）为了尽快观察到细菌培养的实验结果，应将接种了湖水样品的平板置于______ 中培养，培养的温度设定在37℃。要使该实验所得结果可靠，还应该同时在另一平板上接种______ 作为对照进行实验。 （4）培养20小时后，观察到平板上有形态和颜色不同的菌落，这说明湖水样品中有_____种细菌。一般说来，菌落总数越多，湖水遭受细菌污染的程度越_______。 （5）如果提高培养基中NaCl的浓度，可以用于筛选耐_______细菌，这种培养基被称为____。 恒温培养箱 无菌水 多 高 盐（或NaCl） 选择性培养基 4、利用微生物进行发酵来生产特定的产物 （1）果酒和果醋的制作 （2）腐乳的制作 （1）果酒和果醋的制作 果酒制作的原理： 酵 母 菌 有氧呼吸 无氧呼吸 酶 C6H12O6 +6H2O+ 6O2 6CO2 + 12H2O+能量 C6H12O6