植物离体培养育种.pptVIP

植物离体培养育种 ;组织培养的概念; 利用植物体的器官、组织或细胞，通过无菌操作接种于人工配制的培养基上，在一定的光照和温度条件下进行培养，使之生长发育的技术称为组织培养;按培养材料分为（Gamborg等)：;类别 －依外植体的不同划分 ; 植物组织培养是二十世纪发展起来的新技术，近三十年来由于组织培养基础理论研究的深入，发展极为迅速，发表的文献浩如烟海，几乎以植物为研究对象的各个分支学科都在广泛进行组织培养。;发展简史;1958年，英国科学家Steward 等用胡萝卜根的愈伤组织细胞进行悬浮培养，成功诱导出胚状体并分化为完整的小植株，不但使细胞全能性理论得到证实，而且为组织培养的技术程序奠定了基础。 1962年，Murashinge 和Skoog 在烟草培养中筛选出至今仍被广泛使用的MS培养基。 1964-1966年，印度科学家Guha 和Maheswari 在曼陀罗花药培养中首次由花粉诱导得到了单倍体植株。 1972年，Carlson 通过两个种的烟草原生质体融合培养，获得了第一个体细胞杂交的杂种植株。;植物组织培养在技术上的发展;植物组织培养在农业上的应用;组织培养的意义 ;愈伤组织培养是最为常见的组织培养方式？;;;按培养方法：固体培养、液体培养、看护培养、微室培养、包埋培养等;外植体（Explants）;生物学原理 ;植物细胞的全能性（totipotent）：是指植物每个细胞都 具有该植物体的全部遗传信息和发育成完整植株的能力。;植物细胞全能性的表达;离体的植物器官、组织、细胞;植物组织培养特点;技术用途;MS培养基 它是1962年由Murashige和Skoog为培养烟草细胞而设计的。特点是无机盐和离子浓度较高，为较稳定的平衡溶液。其养分的数量和比例较合适，可满足植物的营养和生理需要。它的硝酸盐含量较其他培养基为高，广泛地用于植物的器官、花药、细胞和原生质体培养，效果良好。有些培养基是由它演变而来的。 B5培养基 是1968年由Galmborg等为培养大豆根细胞而设计的。其主要特点是含有较低的铵，这可能对不少培养物的生长有抑制作用。从实践得知有些植物在B5培养基上生长更适宜，如双子叶植物特别是木本植物。;White培养基 是1943年由White为培养番茄根尖而设计的。1963年又作了改良，称作White改良培养基，提高了MsSO4的浓度和增加了硼素。其特点是无机机盐数量较低，适于生根培养。 N6培养基 是1974年朱至清等为水稻等禾谷类作物花药培养而设计的。其特点是成分较简单，KNO3和（NH4）2SO4含量高。在国内已广泛应用于小麦、水稻及其他植物的花药培养和其他组织培养。 KM—8P培养基 它是1974年为原生质体培养而设计的。其特点是有机成分较复杂，它包括了所有的单糖和维生素，广泛用于原生质融合的培养。 ; 包括无机成分和有机成分。无机成分包括大量元素和微量元素。有机成分主要包括糖类、维生素、氨基酸和酰胺类、含氮碱基、生长调节剂、自然复合物（如水解蛋白、酵母提取物、果肉和果汁等）以及其他成分如琼脂等。; 植物对无机盐类的需求具有广泛的一致性，偶然加以变动。一般多采用蔗糖。维生素中最关键的是B1，一般用量为0.1-0.4毫克/升。氨基酸和酰胺只用于某些组织培养，而在器官增殖阶段加入腺嘌呤也可能是需要的。关键的有机成分主要是激素和细胞分裂素。; 可以采用固体或者液体培养基，根据不同植物和不同培养阶段而定。固体培养基中以琼脂质量好，配制时可以通过调节pH值来达到适合的凝胶状态即可。液体培养基养时也有固定和搅动两种。;大量元素;激素;几种激素的配制方法;激素配比模式;Growth medium is optimised for regeneration of plantlets;No BAP? ;No BAP? ; 有机物质(Vitamins and amino acids);固化剂（gelling agent）;碳源;pH计;培养基的选择和配制;母液的配制;以KNO3为例;无菌室;培养基;器皿和接种工具的灭菌;常用方法; 培养所需环境条件 光照强度：一般而言，愈伤组织的形成并不需要光照；　　　　　　　　　　 培养前期1000-4000lx，后期10000 lx。 光照时数：不同培养的组织其光照时间不同，如烟 　　　　　　　　　　　　　　　　　 草愈伤组织采用1000 lx 16小时/日培养； 而花椰菜