2013人教版选修一专题5《DNA和蛋白质技术》课件ppt.pptVIP

DNA的粗提取与鉴定 多聚酶链式反应扩增DNA片段 血红蛋白的提取和分离 * 专题5 DNA和蛋白质技术 课题1 一、基础知识 1、DNA粗提取的原理 （1） DNA在NaCl溶液中的溶解度，是随着NaCl的浓 度的变化而改变的。当NaCl的物质的量浓度为 0.14 mol／L时,DNA的溶解度最低。 （2）DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些物质 则可以溶于酒精溶液。 ：DNA的溶解性和耐受性 （3）蛋白酶能水解蛋白质，但是对DNA没有影响。 大多数蛋白质不能忍受60－80°C的高温，而 DNA在80°C以上才会变性。洗涤剂可以瓦解 细胞膜，但对DNA没有影响。 2、DNA的鉴定原理： 在沸水浴的条件下，DNA遇二苯胺会被染成蓝 色，因此，二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂。 注意:二苯胺要现配现用,否则会影响鉴定结果。 二、实验设计 1、实验材料的选取 原则上只要含DNA的生物材料都可以，但是选 取DNA含量相对较高的生物组织，成功率更大。 2、破碎细胞，获取含DNA的滤液 在鸡血细胞液中加入一定量蒸馏水并用玻棒 搅拌，过滤后收集滤液； 切碎洋葱，加入一定量洗涤剂和食盐，搅拌 研磨，过滤后收集滤液。 血细胞在蒸馏水中大量吸水而张裂； 洗涤剂瓦解细胞膜，有利于DNA的释放； 食盐溶解DNA物质； 选用尼龙布进行