2013人教版选修三1.2《基因工程的基本操作程序》课件ppt.pptVIP

(4)在上述实验中，为了防止目的基因和质粒表达载体在酶切后产生的末端发生任意连接,酶切时应选用的酶是________。 【答案】　(1)目的基因—载体连接物　载体—载体连接物　目的基因—目的基因连接物　分离纯化 (2)载体—载体连接物 (3)启动子　mRNA (4)EcoRⅠ和BamHⅠ(只答一种酶不可) 【误区警示】　(1)切割质粒和目的基因的限制酶一般是同一种酶，以获得互补的末端，利于重组质粒的构建。 (2)目的基因的首端和尾端需加上启动子和终止子。 要点三　将目的基因导入受体细胞 不同受体细胞的常用导入方法 受体细胞 植物细胞 动物细胞 微生物细胞 常用方法 农杆菌转化法、基因枪法、花粉管通道法 显微注射技术 Ca2＋处理法 受体细胞 体细胞 受精卵 原核细胞 受体细胞 植物细胞 动物细胞 微生物细胞 转化过程 以农杆菌转化法为例 将目的基因插入Ti质粒的TDNA上→农杆菌→导入植物细胞→整合到受体细胞的DNA上→表达 将含有目的基因的表达载体提纯→取受精卵→显微注射→受精卵发育→获得具有新性状的动物 Ca2＋处理细胞→感受态细胞→基因表达载体与感受态细胞混合→感受态细胞吸收DNA分子 特别提醒　(1)完成基因表达载体的构建，需要限制性核酸内切酶和DNA连接酶。 (2)Ca2＋(或CaCl2溶液)对微生物细胞的作用是增加细胞壁的通透性。 (3)目的基因能否在植株细胞内稳定保