高效液相色谱-等离子体质谱连用技术测定中药与尿中砷的形态.pdfVIP

第十七届全国色谱学术报告会及仪器展览会会议论文集 o．Z18 高效液相色谱一等离子体质谱连用技术测定中药和尿中砷的形态宰 陈建敏a，b，．’，谈明光b，王俊a，李玉兰b，梁峰6 a深圳市慢性病防治中心，广东深圳518020： b中国科学院上海应用物理研究所，上海201800 关键词：中药，砷，形态分析，高效液相色谱。等离子体质谱连用技术 形态分析及其微量元素形态在生物体内的生物有效性研究最常用和最有效的检测手段。砷是广泛存 在于自然界的有毒元素，砷暴露对人类健康的危害已成为世界严重的公共卫生问题。 砷暴露的途径并不仅限于通过环境中的饮用水和食品等侵入人体，含砷药品也是造成砷暴露的 途径。在传统中药中有不少处方含有砷化合物如雄黄等，其砷总量超过有关重金属限量…1。然而， 仅依据砷总量来考察砷的毒性是片面的，砷的药理及可能产生的毒副作用均依赖于其在中药中存在 的化学形态。现在医学研究表明：砷的毒性与它从体内排泄的速度有关，排泄越慢的砷化物毒性越 定砷总量，开始转向砷形态分析。建立有效的砷的形态分析于环境、生态、食品、临床、药理等都 具有重要的意义。目前，砷元素的化学形态分析成为当前相关领域的热点。 不同于传统的元素分析，由于样品基体复杂、含量低，使得分析形态比仅仅测定元素的总量要 Reaction 态反应池技术的应用(Dynamic 消除干扰的影响来提供可实现的最低检测限制。本文选用常见的牛黄解毒丸和人尿为研究对象，探 讨了HPLC．ICP-MS连用技术应用于复杂基体样品中砷的形态分析实验测定的条件选择，从而正确 评估中药中砷的毒性及安全范围。 1 实验部分’ ． 1．1HPLC条件 使用Series200四元泵高效液相色谱仪带自动进样系统和在线真空脱气机完成色谱分离(美国 mmi．d．x250 PerkinEimer公司)，分离使用的是HamiltonPRP．X100(4．1 mm)阴离子交换色谱柱(美 Scientific， HPLC级)。 1．2ICP．MS条件 使用Elan 的干扰。 ”通讯联系人，陈建敏，Email：jianminbenben@gmail．com 94 第十七届全国色谱学术报告舍及仪器展览会会议论文集 1 3标样与样品制备 砷各化学形态标准储备液购自中国国家标准物质研究中心。所有标准样及样品都在流动相类似 的浓剂混合物中制籍，且分析前至少静置了30分钟。再种类型的中药样品于70C烘干至衡重后研 磨粉碎．使J{f|甲醇与东混合ii莩剂体系葶取。屎样使用流动相1：10稀释后直接取上清液分析。 2结果与讨论 砷的形态分析中，色谱分离条件的选择是关键。鉴于元素形态分析由于既要进行定性分析X要 定量测定，因此，要在保证吾组分完全分离的效果F保留原有的化学形态。本文使用了温和的甲醇 与水混合溶剂体系萃取．磷酸盐缓冲体系等度洗脱．对各形态实现了良好分离。 0．5、1 线使J}j 0和5．0 ugrL建立，每种化学形态得到的线性丈丁O999，表明分析技术具有线性，验 证了分析方法的整体效力。 图l所示为标准与实际稀秆尿样中五种砷的化学形态的分析分离和定量的色谱图，标准样品中 每种砷的化学形态均以lu叽浓度存在。此酗清楚地表明：只需一次进样，10分钟内即可同时检测 出五种砷的化学形态。各种砷的化学形态的检出限达到pm量级。对比实际稀释尿样的图谱进一步 表明DRC技术有效消除了尿样中含有的高浓度的氯离子对传统的ICP．MS测定带来的干扰问题。 综上所述。本项研究证明了使用HPLC-ICP-MS连用技术对复采生物基体样品中的砷的化学形 态同时进行快速分析的可行性。随后对取自各种不同类型含砷中药的分析，以及患者服药后的屎样 筛查，也应用了该方法。本项研究有利于对砷的危险性作准确的评估。 圈I标准与实际稀释屎样