高致病性猪蓝耳病病毒湖北分离株细胞培养特性的研究.pdfVIP

38l 养猪生产与猪病防治专题 0 T030018 高致病性猪蓝耳病病毒湖北分离株细胞培养特性研究木 杨克礼梁望旺伍锐段正赢刘泽文 邓均华郭锐周丹娜 田永祥徐涤平 (湖北省农业科学院畜牧兽医研究所，湖北武汉430064) 引言／目的 猪繁殖与呼吸综合征是由猪繁殖与呼吸综合征病毒引起的以母猪发热、流产，断奶前、后的仔猪死 亡率升高，不同年龄猪呼吸障碍等为临床特征的疾病。2006年6月起，我国南方猪场暴发的高致病性 猪蓝耳病，给养猪业造成了巨大的经济损失。湖北省各主要养猪场于2006年9月先后暴发该病。本课 生物学特性，开展了细胞培养特性研究。 材料方法 复苏Marcl45细胞并进行传代培养，分别将DMEM培养基中的血清含量分别调整为：2％、5％、 105／mL，1．5x105／mL，2x105／mL，2．5x105／mL五个梯度，按10mL／瓶分 分别调整为约5x104／mE， min、150 分别于37℃吸附30min、60min、90min、120 min，以确定最佳吸附时间；在接毒后的24h、 次、2次、3次、4次、5次，以确定最佳冻融次数。TCID50的测定按Reed—Muench方法进行。 结果 毒后60～84h、最佳冻融次数为3次。 讨论 到很高的滴度，已经得到广泛应用。但目前病毒增殖面临一个突出的问题是：PRRSV的增殖滴度受到 多重因素的影响，其中细胞培养是病毒增殖的前提，细胞培养的好坏决定着TCID50的高低。本研究旨 的Marcl45细胞培养的最佳条件，为今后开展进一步的免疫学研究及综合防控技术研究提供理论依据 和技术支持。 参考文献 【11斯特劳BE．猪病学[M】．第8版．张中秋，赵德明，沈建中，等译．北京：中国农业大学出版社，2003：205—230． 1)：60-63． 【3】杨克礼，梁望旺，伍锐，等．高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒湖北株的分离与鉴定【J】．畜牧与兽医，2009，41(1 ·发表于‘江西农业学报》2010年第9期。