种公鸡无精症睾丸基因表达谱建立及分析.pdfVIP

292《》2011年学术年会 T020014 种公鸡无精症睾丸基因表达谱的建立及分析 王竹伟1’2史兆国2陈继兰¨文杰1赵桂苹1郑麦青‘刘冉冉1 胡 娟1李新1刘国芳1朱静1毕瑜林1 730070) (1．中国农业科学院北京畜牧兽医研究所，北京100193；2．甘肃农业大学动物科学技术学院，甘肃兰州 引言／目的 据不完全统计，大约l％～3％的种公鸡会出现无精或少精现象，地方鸡更为明显。研究发现公鸡精 液量与遗传有关，遗传力为0．28(Hu，2010)，但遗传的分子机制尚不清楚。本研究以北京油鸡为试验 动物，采用数字基因表达谱技术(DGE)，建立种公鸡无精症睾丸基因表达谱和正常睾丸基因表达谱， 对差异基因进行分析，以期筛选相关的功能基因，为从遗传上改善种公鸡的繁殖功能奠定基础。 材料方法 在北京油鸡成年种公鸡群中初筛20只体重正常的健康公鸡，每5天采精1次，测定精液量、精液密度、 精子活力、精子活率、精子畸形率，共测7次后，选定1只无精液公鸡和1只产精量大的种公鸡，屠宰取 睾丸样，液氮速冻，一80℃保存。提取睾丸RNA，通过质量检测后，送检华人基因公司，构建DGE表达 谱，分析无精和正常精液量种公鸡睾丸的基因差异表达情况。 结果 C 个，差异最大的是COX(Cytochrome 比有精表达高2倍以上)202个，差异最人的是CyclinF(细胞周期蛋白F)，差异倍数为14．4。 F相关的DNA修复、蛋白氨基酸磷酸化通路、G蛋白藕联信号 代谢、肝糖原代谢等通路，以及与Cyclin 通路和成纤维细胞增殖通路等通路。 GO功能分析显示，一些基因参与了多种生物过程：线粒体呼吸链氧化磷酸化，调节精子体内能量 代谢，DNA的合成、修复、重组和细胞骨架组成和细胞凋亡等。一些基因参与了炎症反应、对病毒的 预防反应等多个生物途径。 讨论 国内外在人类无精症方面做了大量研究，主要集中在无精子症，关于精液量的遗传研究鲜见报道， Hu等(2010)发现，鸡精液量与精子浓度呈高度遗传正相关(rg=O．68)。 研究表明，老年人睾丸中差异表达的呼吸链相关基因cox7a2是重要的弱精症相关基因(辛钟成等， 2003)。COX是否通过影响线粒体呼吸链的功能对生精相关细胞的功能结构产生影响，继而影响精液的 F具有细胞剧期过渡的重要调节能力，通过蛋白的表达和激活，调节细胞 产生，有待进一步研究。Cyclin 从一个时期转化为另一个时期，同时也是细胞处于不同时期的标志蛋白(Grana等，1995)。因此，精子 细胞的生成终止可能取决于它在周期循环停止时所处的时相。 人类无精症研究发现，许多基因通过多个信号通路引起炎症反应。例如蛋白质糖基化与免疫系统及 多种疾病相关(陈德宇等，2009)。本研究筛选到多个与免疫相关的基因和通路。综合结果提示，无精 症可能与能量代谢异常、炎症反应、氧化应激等有关，是多基因多因素互作的结果。 参考文献(略) ，