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中困畜牧兽医学会动物繁殖学分会第十六届学术研讨会论文集
水牛OGT基因的克隆与序列分析
李楠,陆凤花‘,孙洪亮,朱鹏,柯浩,张顺,蒋建荣,石德顺‘
(广西大学亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室,广西南宁530005)
目 的
蛋白质O位N.乙酰葡萄糖胺修饰(O-GlcNAc糖基化修饰)是一种广泛发生在细胞质与
细胞核内的、动态的蛋白质翻译后修饰方式。它是指单个N.乙酰葡萄糖胺
同作用的结果。本研究目的是通过对OGT基因cDNA的克隆和分析,明确水牛OGT的序列
及其结构特点,并进行生物信息学分析,为进一步研究水牛OGT基因结构、基因表达与调
控奠定基础。
材料与方法
水牛卵巢来取自南宁市屠宰场,液氮研磨后使用Trizol法(按照试剂盒所提供的步骤)
(NM001098070.1)序列设计特异性引物,并由深圳华大基因公司合成。上游引物5’.GAA
由上海生工进行测序。
结果及分析
本研究对水牛OGT基因CDS克隆和测序结果进行同源性多重序列比对,及进化树分析。
结果表明,水牛OGT基囚编码序列(CDS)长3426bp,与牛、猪、马、人、小鼠和爪蟾相
应基因序列的同源性分别为100%、96%、95%、94%、90%并n81%。表明克隆到的序列即为
与牛亲缘关系最近。将测序结果提交GenBank,接收号为JN852989。
OGT的主要作用是催化GIcNAc连接到肽链的丝氮酸或苏氨酸残基上。许多生物编码
OGT的基因都被克隆,序列分析后发现其高度保守,人和大鼠的OGT有99%的同源性,大
序列包含23个外显子。OGT蛋白包括N端的蛋白质靶向信息序列、34氨基酸重复序YIJ(TPR)、
连接区域和C端的催化结构域。OGT的催化结构域高度保守。OGT的催化结构域包含两个
Rossman折叠。这两个折叠的存在暗示OGT是糖原合成酶家族。TPR的数目可以在一个很
大的范围内变化。OGT的N端序列对于亚细胞定位非常重要。水牛OGT成熟编码序列的克
隆为进一步研究该基因的结构及作用机理奠定基础。
作者简介:李楠,(1984一),男,河南焦作,在读博士研究生,研究方向:动物胚胎工程
E-mail:1inan520672@126.com
通讯作者:石德顺,(1962-),男,广西桂林,研究员,主要从事动物胚胎工程与转基因动物研究:E-rmil:
与转基因动物研究:E.mail:ifhgggg@163.com:Tel:0771.3235724
基金项日:国家农业部转基因重丈专项(2QQ查兰基Q墨鲤圣鱼堡J;国家自然科学基金项日
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