深圳海域弧菌种类组成、数量分布及其和环境因子的关系研究.pdfVIP

一、海洋调查与研究 深圳海域弧菌种类组成、数量分布及其 与环境因子的关系研究 陈明霞“，李和阳2，李刚37郑天凌1，焦昆1，一，韩永胜1，2 (1．厦门大学生命科学学院，福建厦门361005：2．国家海洋局第三海洋研究所，福建厦门361005；3．深港 产学研基地深圳市海岸与大气重点实验室，广东深圳518057：4．华侨大学化工学院，福建厦门361021) 摘要：研究了深圳海域2008年4月、9月的水体弧菌数量、种类组成及其分布，探讨了弧 菌总数及各优势类群的数量分布与环境因子间的相关关系。结果表明：弧氤总数分布具有季 8．89x102 CFUs／mL；西部海域则秋季略高于春季，其均值分别为5．09x102CFUs／mL、2．66x102 CFUs／mL；弧菌数量最高值出现于大亚湾(4．40x104CFUs／mL)。弧菌的优势类群具有季节 优势类群有M 量分布春季高于秋季。弧菌种类、数量与海水温度、盐度及细菌总数、Chl．a等环境因子有 一定相关性，其中盐度为弧菌种类及数量分布的主要影响因子。 关键词：深圳海域；弧菌种类与数量分布；环境因子 l引言 弧菌是海洋细菌的优势类群之一，广泛分布于世界各地各类河口、内湾、沿岸、水体养 殖区和外海的水体及沉积物中，各种海洋生物体表或体内也常生存着高密度海洋弧菌【lo】， 在海洋环境中占据着重要的生态地位，具有多种多样的生理、生态功能【4‘6]，在海洋微食物 环中扮演重要角色17,Sl，对海洋的营养物的循环起着非常重要的作用。同时弧菌又是水生动 物(包括养殖动物)中的一类重要的病原菌，还是人类的重要致病菌。目前发现至少有12 种弧菌可引起人类疾病【11，20种以上的弧菌可引起养殖动物的弧菌病。随着研究的不断深入， 发现越来越多的弧菌具有条件致病性，因此弧菌及弧菌病的研究引起厂+大科学家的关注，已 成为了海洋生态学、水产学研究的前沿热点之一。 深圳市位于我国南部沿海，海岸线长达257km，海域面积1400km2，按其自然地理条 件分为东部海域(大鹏湾东部和北部、大亚湾西部)与西部海域(由珠江口的东南部、深圳 湾西北部)。深圳海域分布有11个主要海水增养殖区，2个国家重点预报浴场，6个海洋保 护区，12个港口、航道区，沿海风景与度假旅游区共有15个，与人类经济、生活和娱乐密 切相关。海洋产业已成为深圳市重要产业之一。本文以深圳海域为典型研究海域，分别于 2008年4月、9月，对深圳海域弧菌的数量分布、种类组成的时空变化进行研究，分析其与 三科2007021)。 作者简介：陈明霞(1980．)，女，福建惠安人，蹲士研究生，微生物专业，主要从事海洋微生物分子多样 性研究．E-mail：chenmxl257@163．corn．导师郑天凌教授． 通讯作者：李和阳(1978．)，男，福建惠安人，副研究员，主要从事海洋环境微生物生理生态学研究．E．mail： heymgli@126．tom 注：此文发表于海洋学报32(5)：117．126(2010年) 350 ★第五届青年海洋科学研讨会论文集★ 环境因子之间关系，探讨弧菌的条件致病特征及规律，为海洋弧菌性疾病的预警、防治和环 境质量评价提供依据。 2材料与方法 2．1 样品采集 样品分别于2008年4月、2008年9月两个季度采集。每个航次各设置10个站位(图1)。 水深10m以上的采集表层、10m层和底层，水深10m以下的仅采集表层，每个航次各采集 16个水样。每个水层采集500mL水样，保存于4。C(不超过48h)带同实验室后立即分离培 养。相关的海水水质参数由深圳市海岸及大气研究重点实验室提供(表1、2)。 2．2 培养和计数 取适量水样直接涂布于TCBS平板上，于26+I℃培养26+2h，并对典型菌落(蓝绿色、 绿色和黄色)进行计数。每个样品随机挑取30一80个菌株接种于2216E平板上，尽可能保证每 种类型的克隆子按比例挑取。对所分离的菌株在2216E平板上进行3次以上的纯化，以保证 rDNA 得到纯培养物。各菌株用含40％甘油的2216E培养基保种。通过16SrDNA—RFLP和16S 测序分析法(见2．3)对上述分离的菌株进行分型和鉴定，确定不同RFLP谱型所