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Clin
临床口腔医学杂志2010年9月第26卷第9期JStomatol，sep，2010，VoL26．No．9 ·515·
·基础研究·
唾液蛋白质组学唾液样本制备的方法学初探
姜静r，孙其飞：，陈勇s，柳晓兰，，祁森荣z，朱红-，张春梅z
(1．首都医科大学附属北京儿童医院北京100045；2．首都医科大学口腔医学院北京100050；
3．北京蛋白质组研究中心抗体工程研究室北京102206)
[摘要] 目的：通过对唾液淀粉酶单克隆抗体的制备和鉴定，寻找蛋白质组学研究中样本制备关键环节的可行性
方案，为日后唾液蛋白质组学研究奠定基础。方法：将腮腺液经超滤法浓缩蛋白后，进行SDS—PAGE分析，切取分子量
为50～65kDa的高丰度蛋白条带，研磨后注射BALB／C小鼠，诱导产生免疫应答并制备人唾液淀粉酶单克隆抗体，应
用酶联免疫吸附试验和蛋白免疫印记等方法鉴定。结果：成功制备和鉴定了人唾液淀粉酶单克隆抗体。结论：成功制备
和鉴定了唾液淀粉酶单克隆抗体，为唾液蛋白质组学研究中样本制备提供解决方案。
[关键词]腮腺液：蛋白质组学；样本制备
[中图分类号]Q812 [文献标识码]A [文章编号]
An to saliva forhuman
saliva
attemptpreparesample proteome．JTANG．7i，珂，SUNQi-fei2，CHENyo，才，LIU
Medical Childrens
Xiao-lan3，Qtsen—ron雪-ZHUHong，ZHANGChun-meiz．1．Capital Hospital．Beqing
University-Bering
100045，China；2．School Medical A Eh—
ofStomatology，Capital ntibody
Univers妨，Belling100050，China：3．Departmentof
ProteomeResearch
gineering·Be匀讯g Centert每吨102206，China．
andcharacterizemonoelonal for
[Abstract]Objective：Toprepare antibodies(mAb8)againstsalivaryamylasespm—
asolutionofsaliva in ofsaliva．Method：Proteinsinhuman salivawere
sample
riding preparationproteomiestudy parotid
concentratedultmfihrationand SDS．The between kDaWas
byusing analyzedby proteinsstrap 50-65 cut，grinded
andusedtoimmunizeBALB／emice．Themonoclonal inhuman saliva
antibodies(mAbs)againstsalivary
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