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微生物发酵技术 任务3：无菌空气制备 教学安排： 1. 员工培训 由老师讲解空气除菌的理论基础。 分配实操任务：制备无菌空气。 2. 学生模拟组建运营一个无菌空气车间，撰写计划书(在理论教学期间完成)。 市场部：当前空气除菌的技术进展。 技术部：确定空气除菌的技术路线，撰写操作规程。 品控部：制定无菌空气质量标准及检测方法。 总经理：协调监督各部工作，最后拿出完整的计划书。 3. 计划书实施。 计划书要先经过老师的审核，然后实施。 实施过程中考核操作技能。 实施后及时进行实训报告的撰写也总结。 空气除菌 一 空气除菌的方法 (一)加热灭菌 (二)静电除尘 (三)介质过滤除菌 1 纤维介质过滤器 (1)棉花活性炭过滤器 (2)平板式超细纤维过滤器 2 粉末烧结金属过滤器 3 薄膜空气过滤器 (1)Bio-X空气过滤器 (2)高流量空气过滤器 二 介质过滤除菌的机制 (一)纤维介质除菌的机制 惯性冲击、拦截、扩散、重力沉降、静电吸附。 (二)除菌效率 透过率： P=N2/N1 介质捕集效率： η=(N1 – N2)/N1=1 – P 三 空气过滤除菌的工艺流程 (一)经典空气过滤除菌工艺流程 (二)新型空气过滤除菌工艺流程 无菌检查与染菌的处理 一 无菌检查 染菌率的统计： 染菌率=发酵罐染菌批/总投罐批 二 污染杂菌及其处理 (一)种子罐染菌的处理 高压蒸汽灭菌后放下水道 (二)发酵罐染菌的处理 前期染菌：杂菌对生产危害大 灭菌放掉 对生产危害不大 灭菌后重新拌种 营养成分消耗较多 放掉部分，补充部分新的，重新灭菌拌种； 杂菌量少且生产慢 继续发酵，时刻注意观察。 中后期染菌 加入适量杀菌剂； 降低温度或控制补料； 提前放罐。 三 污染噬菌体及其处理 (一)污染噬菌体的发现 发酵液突然转稀，泡沫增多，早期镜检发现菌体染色不均匀，菌丝成像模糊，短时间内菌体大量自溶，平皿培养有噬菌斑，pH逐渐上升，溶氧浓度回升提前，营养成分很少消耗，产物合成停止。 (二)噬菌体的分离 1 双层琼脂平板法 2 电子显微镜检查 (三)污染噬菌体的处理 1 发酵早期出现噬菌体 60℃杀灭，再接种。 2 发酵中期出现噬菌体 适当补充部分营养物质再灭菌接种。 3 添加噬菌体抑制剂 (四)污染噬菌体的设备和环境处理 发酵液：灭菌放掉； 罐体： 甲醛熏蒸，高压蒸汽灭菌； 生产岗位染菌：停产清洗和消毒。 作业： 1、画出一条空气除菌工艺流程图，并作简要说明。 2、如何检测无菌空气质量？ * *