高效液相色谱讲座(1-6)_中科院大连化物所.pdfVIP

讲 座 高效 液 相 色 谱 讲 座* 第一讲 高效液相色谱概貌和设备 王 俊 德 （中国科学院大连化学物理研究所） §1．液相色谱的发展简史 率尚不理想。 色谱是这样一个过程，即混合物中各组 六十年代中后期，由于把从气相色谱得 分在称之为固定相和流动相的两相之间具有 到的广泛的理论和实践上的经验应用于液相 不同的分配系数，因而当此混合物从固定相 色谱系统的设计，以及在机械、光学和电子 的一端加入并随流动相向前移动的过程中， 等技术上的进步，沉睡多年的液相色谱技术 各组分在固定相上有不同的保留而被分离。 开始苏醒。出现了包括高效分离柱、高压输 历史上第一次提出 色“谱”(Chromatogra- 液泵和高灵敏度检测器的近代高效液相色谱 phy)这个名词，并用来描述这种实验的人是 装置和仪器。在柱效、速度和灵敏度方面远 俄国植物化学家茨维特T（swett，他在1906 远超过经典液相色谱。七十年代中期以后， 年发表的关于色谱的论文中写到：一植物色 微处理机技术用于液相色谱，进一步提高了 素的石油醚溶液从一根主要装有碳酸钙吸附 仪器的自动化水平和分析精度。由于高效液 剂的玻璃管上端加入，沿管滤下，后用纯石油 相色谱的实际分离时间可以是比较短的，但 醚淋洗，结果按照不同色素的吸附顺序在管 操作条件的选择和定性定量分析是件费时、 内观察到它们相应的色带，就象光谱一样。茨 费力、麻烦的工作，因而下一个目标将是发 维特把这些色带称为色“谱图”(Chromatog- 展能解决这类问题的具有某些人工智能的色 ram)，相应的方法叫做 “色谱法”(Chroma- 谱仪器。目前高效液相色谱已成为化学、化 tographicmethod)。这就是最初的液相色 工、生化、医学和环保等学科领域中重要的 谱。后来约20年间这一技术并未得到人们的 分离分析技术，是分析化学家手中用以解决 重视。三十年代以后，纸色谱、离子交换色 他们面临的各种实际分析课题必不可缺少的 谱和薄层色谱相继出现。特别是1952年英国 工具。分析仪器国际市场的最近调查表明， 学者马丁 M（artin）和辛格 S（ynge）基于他们 液相色谱 包（括高效液相色谱，柱色谱，氨 在四十年代在分配色谱方面的研究工作，提 基酸分析和离子交换色谱）是分析仪器中最 出了关于气－液分配色谱的比较完整的理论 大的市场。预计在1984年继续以年平均增长 和方法，把色谱技术向前推进了一大步。气相 率20％的速度发展。其中高效液相色谱则是 色谱在此后的十多年间发展十分迅速。1958 增长最快的，达26 。 年基于Moore和Stein的工作，离子交换色 2．高效液相色谱的特点与其他色谱方 谱的仪器化导致了氨基酸分析仪的出现，这 法的比较 是近代液相色谱的一个重要尝试，但分离效 高效液相色谱 (HighPerformance *本讲座的内容曾在1981年大连市科协和辽阳石油化纤总公司主办的两个色谱学习班上讲授过。在这两次学习班上， 担任液相色谱部分讲课的有卢佩章、于衍卿、林丛敬、王俊德、张玉奎、商振华、姚荣余等。本文发表前，曾在卢佩章先 生的统一指导下，由有关同志做了若干重要的修改和补充，并将陆续与读者见面。 LiquidChromatography，简称HPLC）又 TLC）部分地克服了TLC固有的缺点，可以 称高压、高速、高分离度、近代液相或近代 和高效柱液相色谱互为补充。 液相柱色谱，但推荐使用第一个术语，是高 2） 高效液相色谱与气相色谱的比较 效液相色谱，尽管有人时而也称为高性能液 气相色谱自五十年代出现以来，获得了 相色谱。通过以下同经典液相色谱和气相色 飞速发展，它的特点是高效、快速和灵敏， 谱相比较，我们可以看出高效液相色谱具有 其分离分析复杂混合物的能力是以前其他色 分离效能高，分析速度快，检测灵敏度高和 谱方法无法比拟的，应用相当广泛和普遍。 应用范围广泛的特点，特别是适合于高沸点 但是由于气相色谱使用气体流动相，被分析 大分子，强极性和