优化指导　高考生物人教版总复习课件：选修1 专题一 微生物的培养与应用.pptVIP

2．分离分解尿素的细菌所使用的特定培养基 分离分解尿素的细菌的培养基应为选择培养基，培养基中的氮源只有尿素，理论上只有能合成脲酶的微生物才能在上面生长。其配方如下： KH2PO4 　　　　 1.4 g Na2HPO4 　 2.1 g MgSO4·7H2O 　 0.2 g 葡萄糖 　 10.0 g 尿素(唯一氮源) 　 1.0 g 琼脂 　 15.0 g 将上述物质溶解后，用自来水定容到1 000 mL。 3．统计菌落数目的方法 (1)显微镜直接计数法 ①原理：利用特定细菌计数板或血细胞计数板，在显微镜下计算一定容积的样品中微生物的数量。 ②方法：用计数板计数。 ③缺点：不能区分死菌与活菌。 (2)间接计数法(活菌计数法) ①原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌，通过统计平板上的菌落数就能推测出样品中大约含有多少活菌。 ②操作 a．设置重复组，增强实验的说服力与准确性。 b．为了保证结果准确，一般选择菌落数在30～300的平板进行计数。 2．可以鉴定出分解尿素的细菌的方法是 (　　) A．以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂 B．以尿素为唯一氮源的培养基中加入二苯胺试剂 C．以尿素为唯一氮源的培养基中加入苏丹Ⅲ试剂 D．以尿素为唯一氮源的培养基中加入双缩脲试剂 解析：在以尿素为唯一氮源的培养基中，不能分解尿素获得氮源的细菌不能生长，而分解尿素的细菌能利用尿素作氮源，将尿素分解为氨，使pH升高。若培养基中加入酚红指示剂，指示剂将变红。此培养基既属于选择培养基，又属于鉴别培养基。 答案：A 三、分解纤维素的微生物的分离 1．分解纤维素的微生物的分离 (1)实验原理 (2)实验流程 土壤取样：富含纤维素的环境 ↓ 选择培养：用选择培养基培养，以增加纤维素分解菌的数量 ↓ 梯度稀释 ↓ 涂布平板：将样品涂布于鉴别含CR的纤维素分解菌的培养基(固体) ↓ 挑选产生透明圈的菌落：产生纤维素酶的菌落周围出现透明圈。 2．两种刚果红染色法的比较 优点 显示出的颜色反应基本上是纤维素分解菌的作用 操作简便，不存在菌落混杂问题 缺点 操作繁琐，加入刚果红溶液会使菌落之间发生混杂 (1)由于在纤维素粉、琼脂和土豆汁中都含有淀粉类物质，可以使能够产生淀粉酶的微生物出现假阳性反应；(2)有些微生物具有降解色素的能力，长时间培养会降解刚果红，从而形成明显的透明圈，这些微生物与纤维素分解菌不易区分 【特别提醒】(1)选择培养的目的是增加纤维素分解菌的浓度，确保能够从样品中分离到所需要的微生物。(2)涉及到的微生物技术主要有：培养基的配制、无菌操作技术、稀释涂布平板法、选择培养基的作用、土壤取样等。 3．如图为分离并统计分解纤维素的微生物的实验流程，据此回答有关问题： (1)要从富含纤维素的环境中分离纤维素分解菌，从高温热泉中寻找耐热菌，这说明____________________________ ____________________________。 (2)某同学根据需要，配制了纤维素分解菌的培养基如下，整个实验过程严格执行无菌操作。 纤维素粉　NaNO3　Na2HPO4·7H2O　KH2PO4 　5 g　　　 1 g　　　　　 1.2 g　　　　 0.9 g MgSO4·7H2O　KCl　酵母膏、水解酪素 　 0.5 g　　　　0.5 g　　适量 如果将其中的纤维素粉换成____________________，菌落数____________________，即可说明选择培养基的作用。 (3)接种微生物最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法，本实验宜采用________法，原因是 ___________________________________________________。 解析：(1)因为纤维素分解菌与耐热菌有不同的生活习性，生活在不同的环境中，故要根据目的菌株对生存环境的要求，到相应的环境中去寻找。(2)因为葡萄糖是纤维素水解的、是能被微生物直接利用的有机小分子，所以如果将其中的纤维素粉换成葡萄糖，纤维素分解菌及其他细菌会生长繁殖得更快，故菌落数明显多于选择培养基。(3)因为稀释涂布平板法要将菌体进行一系列的梯度稀释，故该法可根据稀释体积计算每克样品中的细菌数，而平板划线法则不能这样，所以本实验宜采用稀释涂布平板法。 答案：(1)根据目的菌株对生存环境的要求，到相应的环境中去寻找　(2)葡萄糖　明显多于选择培养基上的菌落数 (3)稀释涂布平板　平板划线法难以根据稀释体积计算每克样品中的细菌数 专题一　微生物的培养与应用 考纲点击 热点提示 1.微生物的分离与培养 2.某种微生物数量的测定 3.培养基对微生物的选择作用 4.利用微生物发酵