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第四节 温度对发酵的影响及其控制 不同微生物的生长对温度的要求不同,根据它们对温度的要求大致可分为四类:嗜冷菌适应于0~260C生长,嗜温菌适应于15~430C生长,嗜热菌适应于37~650C生长,嗜高温菌适应于650C以上生长 每种微生物对温度的要求可用最适温度、最高温度、最低温度来表征。在最适温度下,微生物生长迅速;超过最高温度微生物即受到抑制或死亡;在最低温度范围内微生物尚能生长,但生长速度非常缓慢,世代时间无限延长。在最低和最高温度之间,微生物的生长速率随温度升高而增加,超过最适温度后,随温度升高,生长速率下降,最后停止生长,引起死亡。 微生物受高温的伤害比低温的伤害大,即超过最高温度,微生物很快死亡;低于最低温度,微生物代谢受到很大抑制,并不马上死亡。这就是菌种保藏的原理。 1、 温度对发酵的影响 温度是影响有机体生长繁殖最重要的因素之一,因为微生物的生长和代谢产物的合成都是在各种酶的催化下进行的,温度是保证酶活性的重要条件。 温度对发酵的影响是多方面的。 1.1 温度影响反应速率 发酵过程的反应速率实际是酶反应速率,酶反应有一个最适温度。 从阿累尼乌斯方程式可以看到 μ = Ae-E/RT 1.2 温度对微生物细胞生长的影响: 在适合微生物生长的范围内,温度高微生物生长速度快、呼吸强,酶失活速度快,菌体提前衰老。温度低,发酵周期延长,影响设备的利用率。不同生长阶段的微生物对温度的反应也不一样,如延滞期的细菌对温度很敏感,最适温度时,可以缩短其生长的延滞期,低于最适温度,延滞期就会延长。微生物的共同特点是:对低温的适应力要强于对高温的适应力。 1.3 温度对产物形成的影响: 温度对产物的影响因种而异,如:柠檬酸生产,黑曲霉的生长最适温度33 ℃~37 ℃,积累酸的最适温度为32 ℃ ,若温度高于32 ℃ ,菌体生长快,糖被利用于生成菌体和呼吸作用,产酸降低。 1.4温度影响发酵方向 四环素产生菌金色链霉菌同时产生金霉素和四环素,当温度低于300C时,这种菌合成金霉素能力较强;温度提高,合成四环素的比例也提高,温度达到350C时,金霉素的合成几乎停止,只产生四环素。 此外,温度还影响氧在基质中的溶解度,氧在发酵液中的溶解度也影响菌对某些基质的分解吸收。因此对发酵过程中的温度要严格控制。 2、最适温度的选择 2.1 根据菌种及生长阶段选择 微生物种类不同,所具有的酶系及其性质不同,所要求的温度范围也不同。 如黑曲霉生长温度为370C, 谷氨酸产生菌棒状杆菌的生长温度为30~320C, 青霉菌生长温度为300C。 在发酵前期由于菌量少,发酵目的是要尽快达到大量的菌体,取稍高的温度,促使菌的呼吸与代谢,使菌生长迅速; 在中期菌量已达到合成产物的最适量,发酵需要延长中期,从而提高产量,因此中期温度要稍低一些,可以推迟衰老。因为在稍低温度下氨基酸合成蛋白质和核酸的正常途径关闭得比较严密有利于产物合成。 发酵后期,产物合成能力降低,延长发酵周期没有必要,就又提高温度,刺激产物合成到放罐。 如:青霉素的发酵生产: 0~5小时 30℃, 6 ~35小时 25℃ 36 ~85小时 20℃ , 86 ~126小时 25℃ 四环素生长阶段28℃,合成期26℃后期再升温;黑曲霉生长37℃,产糖化酶32~34℃。 但也有的菌种产物形成比生长温度高。如谷氨酸产生菌生长30~32℃,产酸34~37℃。最适温度选择要根据菌种与发酵阶段做试验确定。 2.2 根据培养条件选择 温度选择还要根据培养条件综合考虑,灵活选择。 通气条件差时可适当降低温度,使菌呼吸速率降低些,溶氧浓度也可髙些。 培养基稀薄时,温度也该低些。因为温度高营养利用快,会使菌过早自溶。 2.3 根据菌生长情况 菌生长快,维持在较高温度时间要短些;菌生长慢,维持较高温度时间可长些。培养条件适宜,如营养丰富,通气能满足,那么前期温度可髙些,以利于菌的生长。 总的来说,温度的选择根据菌种生长阶段及培养条件综合考虑。要通过反复实践来定出最适温度。 3、引起发酵过程温度变化的因素 3.1 发酵热Q发酵 发酵热是引起发酵过程温度变化的原因。 所谓发酵热就是发酵过程中释放出来的净热量。什么叫净热量呢?在发酵过程中产生菌分解基质产生热量,机械搅拌产生热量,而罐壁散热、水分蒸发、空气排气带走热量。这各种产生的热量和各种散失的热量的代数和就叫做净热
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