大鼠直肠灌注五色散后药动学变化与研究的初探.pdfVIP

201 1年生殖医学论坛 大鼠直肠灌注五色散后药动学变化研究初探※ 贾玉森张岳阳王云涛 (北京中医药大学东方医院泌尿外科男科北京100078 五色散由黄柏、赤芍、白芷、川芎、片姜黄、肉桂、头花蓼、冰片等组成，其中冰片为使药。本方有清热去 湿、行气活血、通郁泄浊的功效，临床以保留灌肠方式给药治疗顽固性慢性前列腺炎疗效显著。本实验以 冰片作为观察对象，初步研究五色散经直肠给药后冰片在大鼠前列腺、前列腺加精囊及lml血浆内的含 量，以观察作为使药的冰片能否进入前列腺而发挥使药的作用，并测定冰片的组织浓度一时间变化关系、 血药浓度一时间变化关系，以做药动学研究。 l材料与方法 1．1材料 1．1．1仪器与药物、试剂美国Agilent6890N气相工作站带Agilent7694E顶空进样器，氢离子火焰检测 ChemstationRev．A，10．02 器；分析柱为HP一5非极性色谱柱(15m×0。53ram×151xm)，分析软件为GC [1757](北京中医药大学中药科技发展中心提供)。五色散(由东方医院药房提供)；正己烷，分析纯，购自 200401)；冰片标准品(中国药品生物制品检定所，批号：110743—200504)。 可号：京动字(2000)第017号。 1．2研究方法 90℃。 1．2．2溶液的配制 2001,zg／ml的冰片标准品母液，冷藏备用。 冷藏备用。 入0．05％NaOH溶液20山，冷藏备用。 1．2．3 给药方法、灌肠方法及样品处理称取五色散三剂研细(含冰片4．59)，用羧甲基纤维素钠溶液 (浓度10％)调制成50ml药液，药物中冰片浓度为：90mg／ml。每只大鼠给药2ml。 200 201 1年生殖医学论坛 1．2．3．1灌肠法大鼠灌肠前禁食不禁水12小时。给药前轻轻按摩并挤压大鼠肛门周围，促使排出直 肠内积存的粪便，然后用灌胃针头轻轻插入大鼠直肠约2cm，将1ml药液缓缓推人，勿将气泡推入，然后立 即用7号线缝合肛门，以防药液外漏。 30斗l×0．8mg／ml、20一×0．8mg／m1分别加入大鼠3ml空白血浆中，形成含冰片量分别为：0．16mg、0．024 mg、0．016mg的3个为l组的高中低浓度血浆，，用于日渐差和日内差的测定。另外取9只空白血浆、前列 腺用手标准曲线的制做。 1．2．3．3前列腺、血液处理方法解剖取大鼠前列腺，用生理盐水洗净血迹，吸纸吸干前列腺表面液体， 称重，将前列腺放入一次性硅化塑料试管(10ral)，标号，置于一20℃冰柜冷冻保存待处理。处理时，用电工 钳、止血钳将冰冻组织反复钳夹成细小组织微粒(必要时用研磨锤捣烂组织)，然后放入容量为20ml的检 20℃冰柜冷冻保存待处理。处理时，先将冰冻的血浆在室温融化，取3ml血浆到5ml离心管，加入lml提 rIll气体。 取液及10微升内标，在快速旋涡混合器混旋5min，然后3000r／min离心10min，顶空进样1 分别以龙脑加异龙脑峰面积之和与内标峰面积之比做自变量，用冰片含量做因变量，用Microsoft—Ex— 脑保留值分别为tr(isobome01)=11．200～11．230rain，tr(bome01)=1 =14．380～14．50rain。 2结果 2．1色谱图 3 1异龙脑，2龙脑峰，3内标 图1 冰片对照品与内标图 l异龙脑，2龙脑峰，3内标 图2血浆内测出冰片 】D 】2 】生 m