马铃薯单细胞分离技术研究-包含继代培养方法.pdfVIP

马铃薯单细胞分离技术的研究——张 宁，司怀军，王 蒂 马铃薯单细胞分离技术 的研 究 张 宁，司怀军，王 蒂 (甘肃农业大学农学院，兰州 730070) 摘 要：以马铃薯栽培品种 “甘农薯 1号”的无茵苗、子叶以及已建立的细胞悬浮培养系为材料， 分别用酶解法和过滤细胞悬浮培养系的物理方法进行了马铃薯单细胞分离技术的研究。结果表明，酶 解时，果胶酶浓度为0．20％～0．25％，解离4h获得的单细胞产量最高，且单细胞分裂频率可达 l6％以 上；另外，酶解愈伤组织分离单细胞，比酶解子叶和叶片效果更好。而在用细胞悬浮培养物进行单细 胞分离研究时，发现瓶壁法是一种最好的细胞悬浮液继代方法，可直接获得90％的单细胞频率，且细 胞形状圆、胞质浓厚。采用过滤法分离单细胞，可得到98％的单细胞频率；3层细胞筛过滤法可有效 提高所得单细胞的植板率。总体比较，过虑细胞悬浮培养物的物理操作方法获得的单细胞比酶解法获 得的单细胞分裂能力更强。 关键词：马铃薯；单细胞分离；酶解法；过滤法；单细胞分裂频率 中图分类号：Q556~．2，S532 文献标识石-q：A 文章编号：1672-36352