碳离子辐照哺乳动物细胞引起旁观者效应.pdfVIP

第22 卷 第5 期 辐 射 研 究 与 辐 射 工 艺 学 报 Vol.22, No.5 2004 年10 月 J. Radiat. Res. Radiat. Process. October 2004 碳离子辐照哺乳动物细胞引起的旁观者效应 1,2 1 1 1,2 1 王菊芳 李文建 周光明 赵 静 党秉荣 1,2 1 1 马秋峰 毛丽敏 冯 岩 1 （中国科学院近代物理研究所 兰州 730000 ） 2 （中国科学院研究生院 北京 100039 ） 摘要 用经过碳离子辐照V79 细胞的条件培养基（Irradiated conditioned medium，简称ICM ）和与受照射细胞 共同培养两种方法，研究了未受照射细胞的旁观者效应。结果表明，ICM 法可以明显降低未受照射细胞的克 隆形成率；受照射细胞与未受照射细胞共同培养一段时间后，细胞克隆形成率比假定没有旁观者效应时的预 期值低，细胞微核率和hprt （次黄嘌呤磷酸核糖基转移酶）基因位点突变率与预期值基本相同。推测受照射细 胞可能释放出了能对未受照射细胞生长产生毒性的因子，这种因子对未受照射细胞没有明显的致微核和致突 变作用。 关键词 旁观者效应，细胞，碳离子辐照，克隆形成率，微核率，突变率 中图分类号 Q691 ，R730 近些年来，越来越多的证据表明：没有受到射 1 材料和方法 线直接照射的细胞或细胞核可以发生多种损伤效 [1] 1.1 细胞及其培养 应。Nagasawa 等 用α粒子辐照中国仓鼠卵巢 （CHO ）细胞时发现，在仅有 1%的细胞核直接受 实验所用细胞为中国仓鼠肺V79 细胞，培养基 到单个α粒子的作用时，也有 30%的细胞呈现出姊 为 1640 （GIBCO 产品）培养液，含 10%新生小牛 妹染色体交换（SCE ）。不仅如此，仅通过照射细胞 血清，100 单位/mL 青霉素和 100µg/mL 链霉素。 [2] 每周传代两次，在5% CO2 培养箱中37℃培养。 质就可引发细胞核的突变 。未受到射线直接照射 的细胞还可以表现出微核率、转化率的提高，细胞 碳离子辐照在φ35mm 的培养皿中进行。辐照 4 的凋亡、死亡及延迟出现的基因组不稳定[3−5] 。这些 前一天将细胞按5×10 /mL 接种到培养皿中。 现象被称作电离辐射诱导的旁观者效应。旁观者效 1.2 辐照 应在致密电离辐射（高LET 射线，如α粒子）和稀 疏电离辐射（低LET 射线，如γ和X 射线）中都有 重离子辐照于兰州近代物理研究所重离子研究 装置（HIRFL ）辐照终端进行，离子种类为 12C6+离 所发现。 子束，能量为 80MeV/u。辐照前将培养皿中的培养 研究旁观者效应的方法主要有两种：一种是用 带电粒子微束辐照少量单个细胞，直接研究周围未 液倒掉，加入少量的pH = 7.2 磷酸盐缓冲液（PBS ） 以维持一定的湿度。将10 个培养皿固定在一个大转 受照射细胞的旁观者效应；另一种是研究受照射细