rhTGF-β1对SD大鼠MSCs骨向分化的影响及机制研究.pdfVIP

· 460 · 中国病理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2014，30(3)：460-466 [文章编号] 1000-4718(2014)03-0460-07 rhTGF-~ 对 SD大鼠MSCs骨向分化的 影响及机制研究木 尹素娟 ， 张荣华 ， 朱晓峰 ， 王攀攀 ，杨 丽 (暨南大学 药学院，附属第一医院，广东 广州510632) [摘 要] 目的：通过观察重组人转化生长因子 p(rhTGF-p。)对大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)增殖和骨向 分化能力的影响，以及对骨形态发生蛋白2(BMP-2)、Smad4及核心结合因子 01【(Cbfa1)的作用 ，阐释其对MSCs骨 向分化影响以及可能的作用机制。方法：用全骨髓贴壁法分离、纯化SD大鼠MSCs；用MTr法检测0、5、10,20、40、 80和 100 g／LrhTGF-Bl对MSCs增殖活性的影响；以碱性磷酸酶(ALP)活性及ALP染色阳性率确定rhTGF．B1的 最佳促 MSCs骨向分化浓度，并以该浓度对MSCs骨向分化进行干预。按是否添加经典成骨诱导液将实验分为：正 常组 经典组、dlTGF-B，组和rhTGF-B，+经典组。通过检测ALP、I型胶原、骨钙素表达和钙化结节的数 目，评价各 组骨向分化能力；通过检测 BMP-2、Smad4和CbhlmRNA的表达，评价各组促MSCs骨向分化的可能作用机制。结 果 ：rhTGF-B，最佳促MSCs增殖浓度为 l0 g／L，最佳促 MSCs骨向分化浓度为 5 g／L。经典组、rGF—p组和 rhTGF—B +经典组均能促进MSCs骨向分化，刺激 BMP-2分泌，并上调Smad4和CbhlmRNA的表达 ，且rhTGF．Bl 对 MSCs成骨分化的早期、中期效果好，而rhTGF-B。+经典组对MSCs成骨分化的晚期效果更为明显。结论：经典 组、rhTGF．p，组和 rGF．p。+经典组均有促 MSCs骨向分化的作用，其机制可能是促进BMP-2的分泌，通过TGF．13 超家~／Smads信号通路调控骨向分化。 [关键词] 骨髓间充质干细胞 ；成骨分化；转化生长因子 [中图分类号] R363 [文献标志码] A doi：10．3969／j．issn．1000．4718．2014．03．014 EffectsofrhTGF- on proliferation and osteogenic differentiation 0f M SCsinSD rats YINSu-juan，ZHANGRong-hua，ZHUXiao-feng2，WANGPan—pan，YANGLi (Collegeofpharmacy， eFirstAffiliatedHospital，MnUnweni@，Guangzhou510632，China．E—mail：doctormonkey @ 126．con [ABSTRACT] AIM：ToinvestigatetheeffectsofrecombinanthumantrnasforminggrowthfactorBl(rhTGF—B1) ontheabilityofproliferationandosteogenicdifferentiationofratbonemaiTowmesenchymalstemcells(MSCs)，aswellas itseffectsonhteexpressionofbonemorphogeneticprotein2(BMP-2)，Smad4andc0 bindingfactorcd (Cbfa1)． METHODS：SD ratMSCswereisolatedandpurifiedbythedifferentialtimeadherentmethod．MTYassaywasusedtocon- finntheoptimalconcentrationofrhTGF-BlfortheproliferationofMSCs．Theoptimalconc