NGF对乳腺癌细胞系MDA-MB-231和MCF-7增殖和存活的影响.pdfVIP

ChineseJournalofPathophysiology 2010，26(墨 ； 二! · 1483 · [文章编号] 1000—4718(2010)08—1483—06 NGF对乳腺癌细胞系MDA—MB一231和 MCF一7增殖和存活的影响 胡梦娜，邹丽娟，袁崇刚 (华东师范大学生命科学学院，上海200062) [摘 要] 目的：研究神经生长因子 (NGF)对乳腺癌细胞系MDA—MB一231和MCF一7细胞增殖与存活的 影响。方法：运用免疫荧光方法检测 NGF及其受体酪氨酸蛋 白激酶 A (TrkA)的表达；运用酶联免疫吸附测定 (ELISA)方法检测细胞的NGF自分泌情况；运用蛋白质印迹(Westernblotting)方法检测 TrkA蛋 白的表达情况；运 用NGF阻断剂R008—2750对细胞进行NGF剥夺，通过单核细胞直接细胞毒性测定法 (MTT)检测细胞增殖的情 况；运用流式细胞仪检测细胞凋亡情况以及细胞周期分布的变化。结果：2株乳腺癌细胞系均表达 NGF及其受体 TrkA，NGF阻断剂 R008—2750能够明显抑制2种细胞的增殖，并具有剂量依赖性 ；流式细胞仪显示 Ro08—2750 处理的MDA—MB一231细胞和MCF一7细胞的s期细胞比例明显增加，G2／M期细胞比例明显降低 ，MDA—MB一 231细胞出现凋亡峰。结论：NGF剥夺明显抑制乳腺癌细胞系MDA—MB一231和MCF一7的增殖 ，并引起 MDA— MB一231细胞凋亡。 [关键词】 神经生长因子；酪氨酸蛋白激酶A；MDA—MB一231细胞 ；MCF一7细胞 [中图分类号] R363 [文献标识码】 A doi：10．3969／j．issn．1000—4718．2010．006 E]ffectOfnerve growth factor on proliferation and survivalofbreast cancercelllineMDA —MB 一231andM CF一7 HUMeng—an，ZOULi—juan，YUANChong—gang (Schoolof蜘 Science，EastChinaNormalUnwe,=ity，Shanghai200062，hCina．E—mail：cgyuan@bio．eci~IL．edu．cn) [ABSTRACT] AIM：Tostudytheeffectofne~／egrowthfactor(NGF)ontheproliferationandsurvivalofbreast cancercelllinesMDA—MB一231andMCF一7．METHODS：TwobreastcnacercelllinesMDA—MB一231na dMCF一7 wereusedintheexperiment．TheexpressionofNGFanditsreceptortyrosinekinaseA (TrkA)Wasdeterminedbythe methodofimmunofluorescence．TheNGF autocrineWas detectedbythemethod ofenzymelinked immunosorbcntassay (ELISA)．TheexpressionofTrkAWasmeasuredbyWesternblotting．TheeffectofNGFblockingagentRo08—2750on hteproliferationofhtecellsWasevaluatedbyMTYassay(mono—nuclearcelldirectcytotoxicityassay)．Thecellapoptosis andthechangeofthecellcycleafterexposedtoRo08—2750wereobserved byflow eytometry．RESULTS：Bothcell linesexpressedNGFandTrkA．Ro08—2750inhibited