Ghrelin对THP-1源性泡沫细胞ATP结合盒转运子A1和G1表达的调控作用.pdfVIP

· 1554· ChineseJournalofPathophysiology 2009，25(8)：1554一 558 [文章编号] 1000—4718(2009)08—1554—05 Ghrelin对 THP一1源性泡沫细胞 ATP结合 盒转运子 A1和 G1表达的调控作用 万晶晶， 成 蓓 ， 王彦富， 梅春丽， 刘 玮， 柯 丽， 何 平 (华中科技大学同济医学院附属协和医院，湖北 武汉430022) 【摘 要] 目的：研究单核／巨噬细胞分化成为泡沫细胞过程中ghrelin对人A11P结合盒转运子Al和Gl (ABCA1／ABCG1)表达的调控作用。方法：体外培养人源单核细胞系THP一1，由佛波酯(PMA)作用使其分化为巨 噬细胞，后者可在氧化低密度脂蛋白(OX—LDL)存在条件下进一步转变为泡沫细胞。巨噬细胞加入不同浓度的 Ghrelin预孵2h后再加入OX—LDL作用不同时间，油红 0染色法观察细胞内脂滴含量，运用 PI一PCR法检测 ABCA1和ABCG1mRNA水平，Westernblotting法检测ABCA1和ABCG1蛋白表达 ，采用酶法，通过荧光分光光度计 检测细胞内外胆固醇含量并计算胆固醇流出率。结果：Ghrelin干预可明显减少细胞内脂滴的形成 ，显著增加胆固 醇流出率，并能显著增加单核／巨噬细胞泡沫化过程中ABCA1和ABCG1mRNA水平和蛋白表达，且此作用呈浓度 依赖性而不呈时间依赖性。结论：Ghrelin可能通过上调 ABCA1和ABCG1转录翻译水平延缓动脉粥样硬化的 发生 。 [关键词] Ghrelin；ATP结合盒转运子A1；ATP结合盒转运子G1；泡沫细胞；动脉硬化 【中图分类号] R363 [文献标识码] A Regulation ofghrelinonexpressionofATP—-bindingcassettetransporter A1／G1inTH]f，一1derivedfoam cells WANJing—jing，CHENGBei，WANGYah—fu，MEIChun—li，UU i，KELi， HE Ping (DepartmentofGeriatrics，UnionHospital，Ton#MedicalCollege，HuazhongUniversityofScienceandTechnology，Wuhan 430022，China．E—mail：chengbei81@yahoo．corn．cn) [ABSTRACT] AIM：ToinvestigatetheregulationofghrelinontheexpressionofATP—bindingcassettetransport— erA1andG1(ABCA1／ABCG1)duringthefoam cellformation．METHODS：Thehumanmonocyticleukemiacellline (THP一1)waschoseninourstudy．ThedifferentiationofTHP一1cellsintomacrophagesWas inducedbyusingphorbol myristateacetate(PMA)．MacrophageswerehtenincubatedwithoxidizedLDL(ox—LDL)togenerateofma cells．Ghrelin ofdifferentconcenrtationsweretreatedatdifferenttimepointsduringfoam cellformation．TheABCA1／ABCGIproteinnad mRNA levelsweredetectedbyWesternblottingandRT—PCR．Th eeffcetofvarianceofcholesterolcontentwasmeasured byzymochemistryvia—fluorospectrophotometer．RESULTS：Ghrelinreducedhtecon