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第34讲 克隆技术
[考纲要求] 1.植物的克隆(Ⅰ)。2.动物的克隆(Ⅰ)。
考点一 聚焦植物组织培养技术
1.梳理植物组织培养程序
配制培养基:配制含有适当营养物质和植物生长调节剂的半固体培养基。
↓切取消毒的组织块。
↓
获得愈伤组织:由相对没有分化的活的薄壁细胞团组成的新生组织。
↓
诱导新植株
2.写出全能性表达的条件
(1)离体、无菌;
(2)一定的营养物质;
(3)植物生长调节剂。
易错警示 植物组织培养易错点
(1)幼嫩的组织脱分化较为容易,如茎尖、根尖、形成层细胞易脱分化,而植物的茎、叶和成熟的组织则较难。
(2)对外植体要进行消毒处理,而对各种器械要彻底灭菌。
(3)植物组织培养中用到的有机碳源一般为蔗糖,用葡萄糖也可以,但后者的成本高。
(4)不同细胞的全能性不同,具体表现为:受精卵生殖细胞体细胞,离体细胞的全能性表达与分化程度呈负相关,但生殖细胞特殊。
(5)脱分化形成愈伤组织的过程不需要光,再分化过程需要光,因为愈伤组织利用有机营养成分,而试管苗需要进行光合作用以自养。
(6)植物组织培养中不同培养阶段培养基含有的激素不同,因为培养的目的不同(生根或生芽)。
1.下列有关细胞全能性的叙述,不正确的是( )
A.受精卵在自然条件下能使后代细胞形成完整个体,因此全能性最高
B.生物体内的体细胞由于细胞分化,全能性不能表达
C.卵细胞与受精卵一样,细胞未分化,全能性最高
D.植物细胞在一定条件下离体培养能表现出全能性
答案 C
解析 受精卵是个体发育的起点,在自然条件下,通过细胞的分裂、分化形成完整的个体,所以全能性最高;体细胞都是由受精卵通过有丝分裂形成的,都含有发育成完整个体所必需的全部基因,理论上讲都应该具有全能性,但由于细胞分化,基因在不同的细胞中选择性表达,因而体细胞并没有表现出全能性;卵细胞在一定条件下,可以发育成新个体,但与受精卵不同,卵细胞的分化程度很高;分化的植物细胞尽管具有全能性,但要表达必须在一定条件下离体培养。
2.下图表示胡萝卜的韧皮部细胞通过无菌操作接入试管后,在一定的条件下,形成试管苗的培育过程,请据图回答下列问题:
(1)要促进细胞分裂生长,培养基中应有营养物质和激素。营养物质包括________和小分子有机物,激素包括细胞分裂素和________两类植物激素。
(2)此过程依据的原理是__________________。A和B阶段主要进行的分裂方式是__________________,B阶段除了细胞分裂外,还进行细胞________等。
(3)此过程需要无菌操作,主要是指对________进行灭菌消毒。B阶段需要光照,原因是________________________________________________________________________
________________________________________________________________________。
(4)试管苗的根细胞没有叶绿素,而叶的叶肉细胞具有叶绿素,这是基因________的结果。
答案 (1)无机物 生长素 (2)植物细胞的全能性 有丝分裂 分化 (3)培养基 芽发育成叶,叶肉细胞中叶绿素的合成需要光照条件 (4)选择性表达
解析 植物组织培养是用离体的植物组织、器官或细胞接种到经消毒灭菌的培养基中,培养基含有供组织细胞生长发育所需要的无机物和小分子有机物,还有供调节细胞分裂、分化和再分化的细胞分裂素和生长素。由外植体发育成试管苗,脱分化阶段细胞进行有丝分裂,再分化阶段愈伤组织经细胞有丝分裂和分化形成试管苗,此阶段需要光照,原因是叶肉细胞中叶绿素的合成需要光照条件。
1.脱分化和再分化的比较
比较内容 脱分化 再分化 过程 外植体→愈伤组织 愈伤组织→幼苗形成体特点 排列疏松、高度液泡化的薄壁细胞 有根、芽 需要条件 a.离体b.适宜的营养c.生长素/细胞分裂素的比例适中d.不需光a.离体b.适宜的营养c.生长素/细胞分裂素的比例高或低诱导生根或生芽d.光照2.植物组织培养
考点二 植物克隆技术及应用
1.原生质体培养
植物细胞原生质体新植株
2.说出植物克隆技术的应用
(1)转基因植株培育。
(2)细胞次生代谢产物的生产。
(3)单倍体育种。
(4)诱发、筛选突变体。
易错警示 植物细胞工程易错点
(1)对植物体细胞杂交和有性杂交辨析不清
①植物体细胞杂交:若两个不同品种的植物细胞A、B进行融合,A含有2X条染色体,2个染色体组,基因型为Aabb,B含有2Y条染色体,2个染色体组,其基因型为ccDd,则新植株应为四倍体,其体细胞中染色体数为2X+2Y,基因型为AabbccDd。从中不难看出,体细胞杂交即两个细胞融合成一个细胞,不管是染色
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