PCR技术检测猪伪狂犬病毒和其潜伏感染部位的研究.pdfVIP

( ) 22 动物医学进展　1997 年　第 18 卷　第 2 期 总第 98 期 研究论文 PCR 技术检测猪伪狂犬病毒及其潜伏感染部位的研究 周复春　陈焕春　李学伍　方六荣　吴　斌　怀济森 (华中农业大学畜牧兽医学院　武昌　430070) 摘　要　本研究合成了伪狂犬病毒糖蛋白 为了有效地控制该病, 减少经济损失和将来最 gp 50 基因引物, 该引物能够扩增糖蛋白 终根除和消灭此病, 保证和促进养猪业的健康发 gp 50 基因中 434～ 651 之间的 217bpDNA 展, 开展伪狂犬病的简便、快速、特异性强、敏感性 片段, 该片段含 Sal 酶切位点, 应用引物 高并能检测潜伏感染的诊断方法研究是非常重要 的。本文报导了用多聚酶链式反应(PCR ) 检测猪伪 对几种不同的伪狂犬病毒株多聚酶链式反 狂犬病毒及其潜伏感染部位的研究。 应 (PCR ) 扩增结果全为阳性。对自然发病 猪、潜伏感染猪、伪狂犬病毒引起的死胎等 1　材料和方法 46 头猪 161 个样品进行了 PCR 扩增, 其中 1. 1　毒株与细胞 46 头猪 71 个样品 PCR 扩增结果为阳性。 　　伪狂犬病毒闽 株、 株、鄂 株, 由本 A Bartha A 羊口疮病毒(OR FV ) 、牛传染性鼻气管炎病 室保存。羊口疮病毒(OR FV ) 、猪细小病毒(PPV ) 、 毒( IBRV ) 、猪细小病毒(PPV ) 及正常细胞 牛传染性鼻气管炎病毒( IBRV ) , 均由本室提供。 对照 PCR 扩增的结果均为阴性。 BH K 21 细胞: 由本室提供, 用于伪狂犬病毒 关键词　PCR 　检测　伪狂犬病毒 的增殖。 猪伪狂犬病是由伪狂犬病毒 (p seudo r ra IBR S2 细胞: 本室保存, 用于 PPV 的增殖。 biesvirus, PRV ) 引起的急性传染病。妊娠母猪表 原代犊牛睾丸细胞: 自己制备, 用于OR FV 及 现为流产、死胎、木乃伊, 尤其以产死胎较为严重。 IBRV 的增殖。 新生仔猪 15 日龄内死亡率 100% 。近年来在我国 某些省市表现为新生仔猪 1～ 7 日内发病, 整窝死 1. 2　工具酶及主要试剂 亡。仔猪表现为体温升高、发抖、运动不协调、痉挛、 酶、 酶、蛋白酶 、十二烷基磺酸钠 Sal I T aq K 呕吐、腹泻, 出现划水运动、圆圈运动、体温下降死 ( ) 、15 1 、10 , SD S mmo l L M gC 2 mmo l L dN T P s [1 ] 亡 。该病对断奶仔猪也引起发病和死亡, 还可以 PCR 反应缓冲液,