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菌物学报
jwxt@ 15 January 2014, 33(1): 121‐128
Http:// Mycosystema ISSN1672‐6472 CN11‐5180/Q © 2014 IMCAS, all rights reserved.
研究论文 Research paper DOI: 10.13346/j.mycosystema.120209
PEG 介导的猴头菌遗传转化体系的建立
1 1 1, 2 1, 2* 1 1
刘莉 肖招燕 郭丽琼 林俊芳 尤琳烽 廖静文
1 华南农业大学食品学院 广东 广州 510640
2 华南农业大学生物质能研究所 广东 广州 510640
摘 要：对猴头菌 Hericium erinaceus 原生质体制备的各种因素进行比较研究，结果表明，猴头菌原生质体制备的
最佳体系为：液体培养 5d 的猴头菌丝，以 0.6mol/L KCl 作为稳渗剂，加入含 1.0%纤维素酶+1.0%蜗牛酶+1.0%溶壁
酶的复合酶，在 30℃酶解猴头菌丝 3h 时，原生质体得率达到 3.0×106 个/mL 。潮霉素敏感性测试表明，猴头菌在
PDSA 固体培养基上的潮霉素最低筛选浓度为 60μg/mL 。采用 PEG 介导的原生质体法，将质粒 pBgGI‐hph （含有灵
芝 gpd1‐Gl 启动子和潮霉素抗性基因 hph ）转化猴头菌原生质体，经潮霉素初步筛选以及 PCR 鉴定，表明有 4 株猴
头菌拟转化子的基因组扩增出 hph 基因；转化子经过多次转接后进行 Southern 杂交验证，结果表明 4 个转化子的
基因组中均稳定整合了 hph 抗性基因。
关键词：猴头菌，原生质体制备，PEG 介导转化
Establishment of genetic transformation system of Hericium erinaceus
using PEG mediated method
1 1 1, 2 1, 2* 1 1
LIU Li XIAO Zhao‐Yan GUO Li‐Qiong LIN Jun‐Fang YOU Lin‐Feng LIAO Jing‐Wen
1
College of Food Science, South China Agriculture University, Guangzhou, Guangdong 510640, China
2
Institute of Biomass Energy, Guangzhou, Guangdong 510640, China
Abstract : The method for protoplast preparation of Hericium erinaceus was studied. The 5‐day‐old mycelia treated with
the mixture of 1.0% lywallzyme, 1.0% cellulase and 1.0% s
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