不同固定化菊粉酶方法的比较和条件优化.pdfVIP

现代食品科技 Modern Food Science and Technology 2008, Vol.24, No.12 不同固定化菊粉酶方法的比较及条件优化 苏豫梅，李清清，李秉超，孙忠思，魏忠环 （沈阳农业大学生物科学技术学院，辽宁 沈阳 110161） 摘要：采用聚乙烯醇-海藻酸钙（PVA-CA ）凝胶包埋法、壳聚糖交联法、D201-GM 阴离子大孔树脂吸附交联法及人造棉绒布共 价偶联法对菊粉酶进行固定化。通过对四种方法的对比得出最佳固定化方法为 D201-GM 阴离子大孔树脂吸附交联法，其固定化酶酶 活力、酶活力回收率及操作稳定性均优于其它三种方法。以D201-GM 阴离子大孔树脂为载体，对影响菊粉酶固定化的重要因素进行 了考察，获得最佳固定化条件。实验结果表明,在 pH 为 5.4，载体与酶的比例为 1:2 的条件下，振荡吸附3 h 后，加入 0.5% （终浓度） 戊二醛，15 ℃交联4 h 时即可获得较好的固定化效果。 关键词：菊粉酶；固定化；D201-GM 阴离子大孔树脂 中图分类号：Q55；文献标识码：A ；文章篇号:1673-9078(2008)12-1296-04 Comparison and Optimization of Immobilization Methods of Inulinase SU Yumei, LI Qingqing, LI Bingchao, SUN Zhongsi, WEI Zhonghuan （Biology Technology College, Shen Yang Agriculture University, Shenyang 110161, China ） Abstract: Four methods for inulinase immobilization, including PVA-CA gelatin entrapment, chitosan crosslinking, D201 macroporous resin absorption-crosslinking method and cotton cloth eovalent coupling method, were compared and D201 macroporous resin absorption-crosslinking method was shown to be the best due to its highest enzyme activity, recovery of enzyme activity and operational stability of the enzyme. The optimal immobilized conditions using D201 macroporousas as the carrier were determined as follows: pH of 5.4 , ratio of carrier to enzyme of1:2, absorption time with shaking of 3 h, glutaraldehyde dosage of 0.5% (after absorption) , the cross linking temperature of15℃ and crosslinking time of 4 h. Key words: inulinase; immobilization; D201-GM macroporous 菊粉是富含于菊芋（Jerusalem artichoke ）等多种 1 材料与方法 菊科植物中的天然果聚糖[1~3] ，系由果糖（Fru ）经 β(1→2)糖苷键连接而成的线性直连多糖[4] 。菊粉酶 1.1 材料与仪器 （Inulinase EC3.2.1.7 ）是菊粉的水解酶，能够将菊粉 1.1.1 主要材料及试剂 快速的水解成为果糖或低聚果糖，由于水解产物具有 菌种 黑曲霉（实验室）；菊糖 国药集团化学