果实特异性E8启动子基因克隆.pdfVIP

果实特异性E8 启动子的基因克隆 王富贵 甘肃农业大学生命科学技术学院，兰州（730070) E-mail ：fgwang@ 摘 要：采用改进的CTAB 法提取番茄基因组DNA ，得到的DNA 纯度最高，效果最好， DNA 溶液多糖含量少且无褐化现象，适于后续的分子生物学操作。设计合成了带有HindⅢ、 BamH Ⅰ特定酶切位点的一对特异引物，优化了PCR 反应体系。通过PCR 扩增获得了 1.1kb 的E8 启动子基因片段，将其克隆到质粒载体pMD18-T Simple Vector 中，经 PCR 、双酶切 鉴定，均获得 1.1kb 预期大小的片段。表明 E8 果实特异性启动子基因片段已正确插入 pMD18-T Simple Vector 载体中。得到了重组子pMD-E8 。 关键词：CTAB 法；E8 启动子；克隆 1. 实验材料 1.1 材料 以番茄品种“毛粉 802”种子为试材。 1.