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奶牛中性粒细胞在血和乳中的形态结构与功能研究概述
1 2 3 1 1 1*
刘庆涛 ,王海丽 ,王杰 ,臧丽 ,潘志忠 ,张乃生
(1.吉林大学畜牧兽医学院,吉林长春130062;2.即墨市普东动物防疫监督站,山东即墨266234;3.即墨温泉动物防疫监
督站,山东即墨 262200)
摘 要:PMN是侵袭性奶牛乳腺炎重要的防御屏障。文章着重介绍奶牛中性粒细胞(PMN)在光学显微镜、透射电子显微镜、
扫描电子显微镜下形态特点,并叙述了PMN 颗粒动力学和各类PMN的生长期、PMN生存期调节与发生奶牛乳腺炎之间的关系,
最后提出奶牛PMN的研究方向。
关键词:PMN;吞噬作用;呼吸爆炸;乳腺炎
多形核中性白细胞(简称中性粒细胞,polymorphonuclear neutrophils,PMN)是一个多形的核,具
有杀死细菌的大量细胞质颗粒,并为吞噬提供大量的糖原。PMN吞噬细菌时,表面卷曲可形成吞噬空泡。
PMN表面存在大量的受体。一些受体能受一些化学引诱物吸引,从而使PMN移行。粘附受体就象PMN移行的
蠕动,穿过内皮细胞间裂隙,到达感染的部位。其他受体能连接免疫球蛋白和补体成分,激活PMN的吞噬作
用和杀菌功能。粘合了细菌毒素和细胞因子的其他受体激活宿主防御功能,使其起重要作用的蛋白质酪氨
酸磷酸化合和表达。
当 PMN 从血液进入乳中时,其形态发生了重要的改变。在牛乳中,PMN 摄取牛乳脂肪和酪氨酸,形成
大量的细胞内空泡。PMN 摄取可导致伪足的丢失和细胞变圆。细胞质颗粒移行并与空泡融合,形成吞噬溶
酶体。细胞质颗粒和细胞膜的大量损失可导致 PMN 吞噬作用和杀菌活性的降低,减弱乳房内的防御能力。
乳腺防御入侵性微生物,主要依靠乳腺组织中 PMN 数量的增加。然而,溶菌主要造成升高 PMN 数量的减少。
PMN 生命周期改变能部分地调节上述过程,而 PMN 的细胞凋亡的增减能抑制或加速这一过程。
1 奶牛 PMN 的形态学
1.1 光学显微镜检查
当用光学显微镜观察瑞特染色的血涂片时,可见清楚的细胞质和大量淡红色的细胞质颗粒。成熟的PMN
包含有多形态分叶的核。核叶有短小的细丝连接。在健康奶牛的血液中很少见到未成熟的PMN[1]。未成熟的
PMN(中幼粒细胞,晚幼粒细胞和带状核细胞)在正常情况下,只有在骨髓中能找到。PMN的带状核细胞可
能是成熟PMN含淡红色颗粒的透明细胞质。当大肠杆菌内毒素注入乳腺时,未成熟的PMN和异常的PMN经常
在外周血的涂片中发现。特点如下:①从血中分离到的中性粒细胞涂片后,可见 22% PMN包含典型多形分
叶的核;②未成熟的血PMN,带状核细胞带有典型的马蹄形核;③未成熟的血PMN,中幼粒细胞带有典型的
巨大球形核;④未成熟的血PMN,晚幼粒细胞带有典型的菜豆型核;⑤能延缓PMN成熟的内毒素可诱发异常
PMN;⑥内毒素引起具有奇异核的PMN的细胞凋亡。
核呈马蹄形者没有分叶。依据核环进行分类,60%的细胞核存在着相似性。中幼粒细胞含有圆形的核,
淡蓝色的细胞质。如果不能仔细辨别,这些细胞很容易和淋巴细胞相混淆。但是,中幼粒细胞含有大量的
细胞质,细胞核没有成片的染色质。晚幼粒细胞也含有淡蓝色的细胞质,但细胞核呈菜豆型状。
当乳腺注入大肠杆菌内毒素引起急性大肠杆菌性乳腺炎时,在血中可检查到未成熟的PMN,并发现“左
移”[1]。注射 18 h后,血液中的PMN的 10%为带状核细胞,20%是未成熟的PMN(包括中幼粒细胞和晚幼粒
细胞)。在这一过程中可发现很多“左移”的异常PMN。毒血症能阻止PMN的分叶和细胞核形成马蹄形;而
稠密成群的细胞质和正常成熟分叶PMN的细胞质相似。毒血症另一特征是出现奇异形状核的PMN。
1.2 透射电镜检查
循环血和乳中的PMN超微结构已经被人所知[2,3]。最主要的特征是有多分叶的核。这些多叶的核很重要,
PMN可把核叶排列成一条直线,在内皮细胞之间快速的移行。相反,大单核细胞有很大的马蹄形核,较难
在内皮细胞间移行。因此,PMN移行先于大单核细胞,最先到达感染的位置。
1.2.1 嗜苯胺蓝颗粒
在PMN的细胞质中,很多糖原和杀菌颗粒都具有杀菌能力。象其它动物一样,奶牛PMN中含有特异的嗜
苯胺蓝颗粒。嗜苯胺蓝颗粒或者初级颗粒是粒细胞形成前骨髓细胞阶段首先出现的颗粒[
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