EB终结者R的ed凝胶核酸染料,DMSO.doc

EB终结者Red 凝胶核酸染料10,000×DMSO （Nucleic Acid Gel Stain, 10,000×DMSO） Cat number：KGM025R For Research Use Only Store at 4℃ for six months Expire date： 试剂盒说明 EB终结者Red凝胶核酸染料是一种高灵敏度的用于检测琼脂糖凝胶以及丙烯酰胺凝胶中的核酸荧光染料，不论是双链还是单链的DNA或者RNA，EB终结者Red染料都有很灵敏的染色信号。使用者可以选择在制备凝胶过程中或者制备完毕之后进行染色。EB终结者Red染料可以匹配300nm、254nm或者蓝光紫外透射仪，也可以用于匹配了可见光激发器如488nm激光器的凝胶成像仪。 本产品是10,000X的EB终结者Red染料浓缩型溶液，用于制胶前染色可以被10,000倍稀释，用于制胶后染色可以5,000倍稀释。1管10,000X溶液至少可以用于染色100张迷你胶。 用EB终结者Red染色凝胶中的核酸可以用于下游的胶抽提和克隆实验。EB终结者Red染色可以通过酚/氯仿抽提以及乙醇沉淀的方法很高效地从DNA中去除掉。 EB终结者Red光谱特性 Excitation (blue) and emission spectra (red) of EB终结者Red bound to dsDNA in TBE buffer. EB终结者Red Dye Ex/Em: 535/615 nm, bound to nucleic acid. . 试剂盒组份 组 份 Cat: KGM025R-100 Cat: KGM025R-500 储存条件 EB终结者Red Nucleic Acid Gel Stain 100μL 500μL 2-25℃，避光 操作说明 制胶后染色 1.1、根据您的实验步骤进行核酸的凝胶电泳。 1.2、以TE、TBE或者TAE buffer稀释EB终结者Red 10,000X储液试剂5000倍，成为2X EB终结者Red染色液。 1.3、小心地将凝胶转移至聚丙烯容器中，缓缓倒入足量的2X EB终结者Red染色液，保证浸没胶体。 1.4、室温下，缓慢轻摇凝胶，染色30分钟。 1.5、以去离子水洗去多余的染料，用标准300nm紫外透射仪或者匹配了红光滤色片（如EtBr）的激光凝胶扫描器。 成胶前染色 2.1、根据您的实验情况，准备合适的热琼脂糖凝胶溶液。 2.2、以1：10,000倍稀释EB终结者Red 10,000X储液试剂至热的琼脂糖凝胶溶液中，彻底混匀。 2.3、制胶，静待凝固。 2.4、根据您的实验，进行上样电泳。 2.5、用标准300nm紫外透射仪或者匹配了红光滤色片（如EtBr）的激光凝胶扫描器进行成像观察。 注意事项：成胶前染色不推荐用于聚丙烯酰胺凝胶。对于聚丙烯酰胺凝胶推荐成胶后染色。 EB终结者Red 凝胶染色（成胶后染色）结果照片 疑难解答 问题 建议 成胶前染色出弥散拖尾的DNA条带 1.降低DNA上样量，这种情况可能是因为过量DNA上样造成。 2.用制胶后染色代替制胶前染色。 3.对于大片段DNA可以考虑利用更低浓度的琼脂糖凝胶。 4. 更换电泳buffer，TBE缓冲能力要强于TAE。 成胶前染色DNA迁移结果不符合预期 降低DNA上样量。 降低染料用量，如在成胶染色操作中使用0.5X浓度。 3. Perform post-staining instead of pre-casting. 弱荧光信号 1.溶液中的染料可能有沉淀析出，涡旋振荡使之重溶。 2.增加所使用的染料用量，如在成胶染色操作中使用2X浓度。 五、常见问题 Question Answer EB终结者Red可以用于染ssDNA或RNA吗？ 可以。 EB终结者Red染料染色之后样品可以用于做下游的克隆、连接和测序实验吗？ 可以的。我们推荐使用Qiagen或Zymo胶抽提试剂盒或者酚氯仿方式抽提DNA，可以将染料去除。 EB终结者Red染料染色之后的样品可以用于Southern或者Northern实验吗？ 目前，EB终结者Red染料尚未有在杂交实验方面的验证数据。 成胶染色的凝胶在电泳完毕之后可以重复使用吗？ 我们不推荐您重复利用，荧光信号在二次电泳之后会减弱。 EB终结者Red染料的最低检测值是？ 有的客户给我们的结果是可以检测小于0.5ng的DNA，不管怎样，检测的最低值实际上取决于仪器和曝光等设置。 需要避光使用EB终结者Red染料吗？ 这无所谓，当然我们推荐您使用该染料时最好避光。