1%2c25(OH)2D3对TGF-β1诱导人肾小管上皮细胞转分化干预效应与其机制研究.pdfVIP

全国中西医结合发展战略研讨会 第四部分书面交流 PU．173 干预效应及其机制的研究 陈明李晶郭吉雷 成都中医药大学附属医院 610072 【摘要】目的：肾小管间质纤维化是各种慢性肾脏疾病发展到终末期肾功能衰竭的共同途 径。肾小管上皮细胞·间充质细胞转分化(Tubularepithelial-mesenchymaltransition，TEMT) 在肾小管间质纤维化的进展中起着重要作用。转化生长因子一61(transforminggrowth Smads蛋白是TGF．p信号转导过程中最重要的胞内效应因子之一，它能将TGF．p信号由 胞膜转入核内。Smad3过度表达及Smad7被抑制是肾脏纤维化的主要原因。1。25-二羟维 生素D(1，25-dihydroxyvitaminD3，1。25(OH)2D3)是体内最重要的维生素D活性产物，通 D 过与其受体-维生素D受体(vitaminreceptor，VDR)结合发挥生物学效应。已有研究表明 1。25(OH)2D3可以改善肾脏纤维化，但尚未有关其改善TEMT分子机制的报道。本实验通 过检测1，25(OH)2D3对TGF．61诱导人肾小管上皮细胞转分化过程中的E-钙粘蛋白 muscle (E—Cadhenn，E-Cad)、a-平滑肌肌动蛋白(a-smoothactin，a-SMA)、VDR、Smad3、 细胞转分化的干预效应及其分子机制，为临床肾脏纤维化的药物治疗提供更多的理论依据。 方法：体外培养正常人肾小管上皮细胞(HK-2细胞株)。将细胞随机分为5组：正常对照组、 TGF一61(5ng／m1)组、TGF·131(5ng／m1)+1，25(OH)2D3(10·9mol／L)组、TGF一131(5ng／m1)+ 0—7mol／L)组。每组设三复孔， 1,25(OH)2D3(10-8mol／L)组、TGF一61(5ng／m1)+l，25(OH)2D3(1 分别于加入干预因素后12h、24h、48h、72h，使用倒置显微镜观察细胞形态学变化，免疫 组化法和Real-time 诱导组细胞形态发生改变，从原有典型的铺路石样上皮细胞形态转变为长梭形类似成纤维细 胞的形态，且呈时间依赖关系；免疫细胞化学结果提示a-SMA、Smad3蛋白的表达随时间 317 全国中西医结合发展战略研讨会 第四部分书面交流 Real time-PCR结果示a—SMA、Smad3、Smad7 mRNA的表达随时间明显增；bfl(P0．05)。 E-cadherin、VDR 分HK-2细胞呈成纤维细胞样形态外，其余各1，25(OH)2D3干预组均不同程度的抑制了 免疫细胞化学结果同样显示除 TGF．B1诱导的细胞形态学改变； 2h和24h后a·SMA、E-cadhenn、 TGF一131(5ng／m1)+1，25(OH)2D3(10-9mol／L)组在培养1 肾小管上皮细胞转分化有一定的抑制作用，且呈剂量依赖关系。(2)1。25(OH)2D3对TGF-131 诱导的人肾小管上皮细胞转分化的抑制作用可能与其上调VDR、Smad7的表达，下调 Smad3的表达有关。 PU．174 糖尿病肾病中医证候分布研究 丁英钧1,2王世东2王颖辉2傅强2赵进喜2 1河北医科大学中西医结合学院2北京中医药大学东直门医院050091 【摘要】目的：探讨糖尿病肾病(DN)的中医证候特征、分布及演变规律。方法：基于。十一 五。临床数据采集平台，对DN中医证候进行多中心、分层、横断面调查。结果：DN症状以 神疲乏力、咽干口渴、面足浮肿、口唇舌紫、或紫暗、瘀斑、舌下络脉色紫怒张等多见；气 虚证、血瘀证3期构成