8-溴-7-甲氧基白杨素对MHCC97-H细胞系肝癌干细胞特性和β-catenin表达的影响.pdfVIP

分类号 密级 学校代码 10542 肝癌干细胞特性和13-catenin表达的影响 Effectsof on characteristics and of of expression13—-catenin 1’ 11 ● ● ● 一 livercancerstemceils clerlvedtrom MHCC97一Hcellline 研 究 生姓名 直童丝 指导教师姓名、职称 萱建国熬撞 学 科 专 业 生药鲎 研 究 方 向 盟疸药堑荭堡堂 湖南师范大学学位评定委员会办公室 ． 二。一四年五月 摘要 cancerstem MHCC97．H细胞系肝癌干细胞(1ivercells，LCSCs)特性和 调控B—catenin蛋白表达。 ActivatedCell 方法：免疫磁球分选法(Magnetic cells，SFCs) 粘附板培养富集并扩增CDl33+球形成细胞(sphereforming 胞术(flow 和有限稀释法比较LCSCs和亲本细胞自我更新能力；Westernblot对 植模型，比较LCSCs和亲本细胞的致瘤性。不同浓度BrMC处理 贴壁生长形态、肿瘤球形成试验评价自我更新能力、Matrigel体外细 胞侵袭试验检测体外细胞侵袭能力、Western Balb／c．nu小鼠原代和再次接种异种移植模型，分析BrMC体内靶向 interfering 33、CD44表达和肿瘤球形成能 BrMC对LCSCs细胞13-catenin、CDl 1 力影响。 结果：PE标记CDl33荧光抗体FCM分析结果显示：免疫磁球分选 CDl33+细胞和亲本细胞能在干细胞条件培养基中形成肿瘤球，但是 CDl33+细胞肿瘤球形成能力更强(球数目：CDl33+细胞：167士31VS亲 本细胞：61士26；球体积：CDl33+细胞：397士45w亲本细胞：153131 gm3 SFCs能形成新的肿瘤球。Westernblot分析结果显示，SFCs高表达干 ZO一1)。倒置显微镜下观察到单层贴壁生长的CDl33+SFCs呈梭形， 而亲本细胞则呈鹅卵石样形态；Matrigel体外细胞侵袭试验发现，与 亲本细胞相比，CDl33+SFCs具有更高的体外侵袭能力。裸鼠皮下成 移植瘤和亲本细胞移植瘤具有相似的组织学形态，但是，CDl33+ 为0．5 的间质细胞形态向上皮细胞形态过渡。肿瘤球形成试验和二次传代成 TT 球试验结果显示BrMC(0．1、O．3、1pM)抑制LCSCs自我更新能力 衅0．05)。Westernblot分析结果显示BrMC(0．1、0．3、1gM)上调LCSCs 细胞侵袭试验结果显示BrMC以浓度依赖方式抑制LCSCs体外细胞 侵袭能力(PO．05)。Westernblot分析结果表明BrMC(0．1、0．3、1pM) 接种裸鼠皮下移植瘤实验结果显示来自溶媒(精制橄榄油灌胃)对照 组