实时荧光定量PCR法检测对虾白斑综合征病毒.pdfVIP

白斑综合征(White spot syndrome,WSS) 是全球对虾养殖业所面临的危害性最大的病害之一, 是国际兽 医局(OIE)规定需要报告的重要水生动物传染病[1] 。该病于20世纪90年代初首先在我国台湾地区发生, 1993 年开始造成我国很多地区的对虾发病，1994以后又在泰国、印度、朝鲜、日本及太平洋海岸国家酿成暴发 性流行病，至今已波及全世界几乎所有对虾养殖区, 造成了巨大的经济损失。WSS 的病原为白斑综合征病 毒(White spot syndrome virus,WSSV) 。由于该病毒的巨大危害，近年来成为对虾病害研究最活跃的课题之 一, 建立了多种检测技术。Lo(1996)构建了WSBV(PmNOBⅢ)基因组(Sa Ⅰ酶切)文库,根据其中一个较大片 段(1461bp) 的序列设计了内外两套引物,PCR产物分别为1447bp及941bp[2] 。其中1447bp的核酸片段经Dig标 记广泛用于WSBV感染的早期检测。孔杰等(1997)将RAPD技术用于对虾病毒的检测。研究显示:1994和1995 年发病对虾中的杆状病毒DNA 的RAPD 电泳图谱完全一致,证实这两年度引起的中国对虾爆发性流行病病 原为WSSV[3] 。Kimura(1996)克隆了PRDV(R