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交叉和血.ppt
交叉配血 湖南省第二人医院输血科 欧阳旋 交叉合血 交叉配血试验是输血前必要的步骤,主要是检查受血者血清中有无能破坏供血者红细胞的抗体。主要目的是为了防止输血后产生溶血性反应。 尽可能确保对人和一个病人来说,输了供血者的血不会引起有害反应,并且使红细胞在输注后能保持最长的存活时间。 交叉配血试验的内容 主侧配血 用患者血清与供 者红细胞进行试验 次测配血 供血者血清与患 者红细胞进行试验 交叉配血的基本要求 主侧配血要求: 绝对不可以有凝集或溶血现象。 次测配血要求: 供血者血清加受血者红细胞在允许范围内,可以有凝集现象,但不可以有溶血。 交叉配血方法 盐水介质配血 抗球蛋白法配血 聚凝胺介质配血 凝胶微柱法配血 交叉配血的方法 盐水法 输血前检查最常用的试验方法为试管法。 进行交叉配血要防止冷凝集反应,室温控制在22±2℃以上。 在光线良好的背景下观察。 观察是否有溶血现象。 操作要严格、规范。 交叉配血的方法 盐水法 盐水法交叉配血试验只能检出不相配合的完全抗体( 天然抗体IgM) ,而不能检出不完全抗体( 免疫性抗体IgG) ,使其安全性受到了极大限制。但由于其方便、快速,对临床上应用仍然是必要。 交叉配血的方法 盐水法 交叉配血的方法 抗球蛋白法 又称Coombs 试验。是最可靠的确定不完全抗体的方法,但操作繁琐。 抗球蛋白法配血法是最早用于检查不完全抗体的方法。 直接抗球蛋白法可检查受检者红细胞是否已被不完全抗体致敏。 交叉配血的方法 抗球蛋白法 间接抗球蛋白法可用于鉴定Rh 血型及血清中是否存在不完全抗体。 本法虽较灵敏,但也有一定限度,且操作复杂,不利于急诊检查和血库的大批量工作。 抗球蛋白配血方法 抗球蛋白方法配血方法 交叉配血的方法 凝聚胺法 凝聚胺法既可以检测出完全抗体,又可检测出具有临床意义的不完全抗体,同时可帮助临床诊断一些自身免疫性疾病,尤其是自身免疫性溶血性贫血。 该方法与传统的盐水配血法相比较,结果发现凝聚胺法灵敏度高出盐水法2 ~ 250 倍,而且具有方法简便、时间短、灵敏度高、结果明显等优点。 交叉配血的方法 凝聚胺法 值得注意的是患者使用一些药物常能干扰和影响凝聚胺配血。 ①肝素与枸橼酸钠是临床上常用的抗凝药,也是常用的检验标本抗凝剂,如果用使用过肝素的患者的血标本或者用枸橼酸钠做抗凝剂的标本,在交叉配血中红细胞与相应抗体之间反应不易凝集,而用 EDTA - K2做抗凝剂的标本,无此影响。 ②低分子右旋糖酐,低分子右旋糖酐干扰交叉配血时,加入凝聚胺试剂后,均引出红细胞非免疫性的可逆聚合,但再加入悬浮液后,出现镜下串钱状凝集,串钱状凝集的出现往往易与真凝聚相混合,但串钱状凝集并不是真正的凝集,真凝集为红细胞上的抗原与血清中的抗体紧密结合,红细胞堆积成块状,而假凝集时,红细胞似铜钱一个个相互串联在一起,此种凝集较疏松,因此在交叉配血试验中真凝集与串钱状假凝集现象一定要严格区分,要注意了解分析病史,排除干扰因素后才能使结果的准确可靠。 交叉配血的方法 微柱凝胶法 微柱凝胶实验应用游离红细胞和凝集红细胞是否能通过具有分子筛作用的凝集颗粒构成的胶体介质,从而使不同状态的红细胞得以分离这一方法,应用分子筛技术、离心技术和特异性的免疫反应技术原理。 该方法为国际公认的安全输血的推荐方法,在国外已普遍采用。现在国内已逐步开始广泛应用。 交叉配血的方法 微柱凝胶法 采用标准化定量操作,最大限度减少操作人员的随意性。同时客观性好,由于采用凝胶分子筛技术,将凝集的红细胞和游离的红细胞分离开,使结果一目了然,避免了镜下的主观影响。 自动化操作,减少实验人员的误操作。由于试验中加入了抗人球蛋白,能促进红细胞的特异性凝集,故能捕捉到十分微弱的抗原抗体反应,最大程度地保障安全输血。 交叉配血的方法 微柱凝胶法 微柱凝胶法具有灵敏度高、特异性好、结果准确、稳定、清楚、易读,操作简便快速,试验不用洗涤,减少污染,样本体积小等特点。 微柱凝胶法对血液标本要求严格,如红细胞浓度过高过低或离心不彻底、血清中含纤维蛋白出现细胞凝块、细菌污染以及标本保存时间过长等均易导致假阴性或假阳性。 交叉配血不合原因 交叉配血不合原因分类 对引起交叉配血不合的原因进行分析,可将原因分为非免疫性和免疫性。 非免疫性原因是因为清蛋白和球蛋白比例倒置、血清蛋白紊乱或者由于部分药品对红细胞表面的zeta电位造成了破坏,导致交叉配血时红细胞呈串状凝集。非免疫性原因引起的交叉配血不合主要表现为主侧凝集。 免疫性原因是患者自身抗体或患者自身机体由于某种原因
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