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- 2015-08-15 发布于重庆
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生物样品制备.ppt
超滤是一种除去样品中蛋白质和其他大分 子的方法,利用分子分离的薄膜分离技术, 依靠薄膜两侧压力差作为推动力来分离溶 液中不同分子量的物质。 超滤膜的制作材料有醋酸纤维素、聚酰胺、 聚砜等,其中醋酸纤维素最常用。 与沉淀法相比,超滤的优点在于适用于小量 样品,不用稀释样品也不用改变样品的pH 值,尤其适用于对酸碱不稳定的化合物特 别是欲测组分易被某种酶分解时用超滤可除 去该酶,避免欲测物分解。 但超滤可能会由于欲测组分结合在膜上面影 响回收率。 (6)凝胶层析 利用分子大小不同的物质在流过凝胶固定 相的保留时间不同,大分子首先流出,小 分子最后流出,可将欲测小分子化合物与大 分子蛋白质分离。 由于欲测小分子化合物的浓度被流动相所 稀释,必要时还要进行浓缩后再用色谱分 析。 ((7)柱层析 用能吸附蛋白质的材料装填成小柱,使欲测蛋 白质的样品流过小柱,样品中的蛋白质被柱填 料吸附,欲测组分不被吸附,从小柱中流出。 这种小柱称为预柱。 预柱可以直接连在HPLC的进样装置上,含蛋 白质的样品通过预柱后可直接HPLC系统分析。 如分析尿中的某些代谢产物时,可将样品通 过预柱,除去蛋白质,直接进入HPLC分析。 (8)高速离心 原理:高速离心是根据物质
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