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Netrin1诱导促性腺素释放激素神经元迁移的研究.pdf
Netrin-1 诱导促性腺素释放激素神经元迁移的研究1
苑琳, 王俊杰,郭宇光,张魁,王兴智,朱筱娟
东北师范大学遗传与细胞研究所, 分子表观遗传学教育部重点实验室,长春(130024 )
E-mail: zhuxj720@
摘 要:神经系统发育过程中多种导向因子介导神经元与其靶细胞之间的精确联系,这些因
子通过作用于神经突起生长锥上的受体来吸引或排斥神经突起生长,从而决定了神经纤维的
生长路线以及神经元与特定靶细胞的功能联系。netrin-1 是第一个被发现的可溶性神经导向
因子,其在神经系统中的典型功能是与受体DCC 结合吸引神经突起的生长。本实验拟使用
促性腺素释放激素(Gonadotropin-releasing hormone, GnRH )神经细胞为研究模型,建立双
细胞团培养方法,用netrin-1 诱导GnRH 神经元亚克隆系NLT ,观察细胞生长的诱导情况。
结果表明,本研究建立了利用双细胞团研究神经导向功能的研究模型,用netrin-1 诱导培养
的NLT 细胞发生了明显的定向迁移,明确了netrin-1 对NLT 的神经元导向功能,为进一步
深入研究netrin-1 在神经系统中的功能和分子机制奠定基础。
关键词:netrin-1 ;NLT ;神经元导向;细胞团;胶原凝胶
神经系统是由神经元与其靶细胞相互联系而形成的复杂而精确的网络,各种基本的生理
活动都依赖于神经元之间形成的精确联系,这些联系的形成主要包括神经元的产生和迁移,
以及神经元轴突和树突的发育,最终与靶细胞形成特定的联系。所以,神经轴突的生长和导
向是形成神经系统功能的前提和基础。近年来,关于神经细胞的迁移越来越受到研究者的关
注。
在神经细胞迁移过程中,生长锥起关键作用,在生长锥表面存在许多导向因子的受体,
将胞外信号传递到胞内,改变cAMP、cGMP、PKA 或者Ca2+ 的含量,通过调节肌动蛋白的
聚合和解聚来引起细胞骨架的重排,最终使轴突产生定向生长[1] 。近年来,人们从果蝇, 鼠,
秀丽线虫以及人类等众多物种中发现了一系列神经导向因子,主要包括 netrin[2 、3] 、
semaphorins 、slit 和 ephrin 四大家族。这些因子大部分为分泌性分子,在一定距离范围内
形成浓度梯度,引导轴突生长锥的趋向生长。神经导向因子中,netrin 基因家族越来越受到
研究者的关注。Tessier-Lsvigne 等[4]于1998年发现并分离了一类由鼠胚脊髓底板分泌的因子,
它能够特异性地吸引轴突向底板方向生长。将分离的两种分子量约为 80kDa 的蛋白质,分
别命名为netrin-1 和netrin-2 ,后来又相继报导了该蛋白家族的其它成员包括线虫的UNC-6,
果蝇的netrin-A, netrin-B 以及存在于小鼠和人体内的netrin-3 。然而分布最广泛的是netrin-1 ,
它在多种器官中的多种作用也逐渐被揭示。关于netrin-1 最经典的作用是对中枢和外周神经
细胞迁移的双重导向作用:吸引或排斥轴突生长。Bashaw 等[5]通过实验研究表明:吸引或
排斥作用主要取决于生长锥上所表达的受体种类及信号传导机制的不同:当表面受体为
DCC(deleted in colorectal cancer )家族受体时,介导轴突的吸引生长;而当表面受体为UNC5H
家族受体时,介导轴突的排斥生长。
随着对 netrin 家族导向因子研究的不断深入,研究者逐渐认识到神经导向因子 netrins
的功能是复杂的。首先,在中枢神经系统及周围神经系统中,其主要功能在于它们是轴突生
长的导向因子,能够诱导发育的轴突生长至靶细胞。其次,他在神经系统之外的许多组织:
如心脏、胰腺、卵巢、肝脏、肺等器官中都发挥着重要作用[6] 。另外,由于肿瘤发生和神经
细胞迁移有很多的相似性,所以人们逐渐发现netrin-1/DCC 与肿瘤的一些关系。研究发现,
1本课题得到国家自然科学基金);教育部新世纪优秀人才支持计划(NCET-07-0173 );教育部博
士点基金(20060200008 )和教育部回国人员启动基金的资助。
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