固相微萃取与同时蒸馏萃取法分析香精成分比较.pdfVIP

固相微萃取与同时蒸馏萃取法分析香精 成分比较 同时蒸馏萃取法( ＳＤＥ)[1,2]是近一二十年发展起来的用于分析样品中挥发性、半挥发性成 分的分离方法。该法将水蒸气蒸馏与溶剂萃取合二为一,减少了 实验步骤,缩短了分析时间, 节省了萃取试剂;固相微萃取法( ＳＰＭＥ)[3,4]是用内涂固定液的石英纤维萃取样品中的化 学成分,具有分析时间短、不使用 有机溶剂、样品不需前处理等优点。为了考察这2 种萃取 方法的差异,本实验采用ＳＤＥ和ＳＰＭＥ分别对烟用香精的香味成分进行了分析比较, 内容 包括2 种萃取 方法鉴定出的化学成分数目、重复性和定量结果,重点考察了ＳＤＥ和ＳＰＭ Ｅ在半定量方面的优劣。 1 实验/ Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌｐｒｏｃｅｄｕｒｅ 1.1 材料与仪器/ Ｍａｔｅｒｉａｌｓａｎｄａｐｐａｒａｔｕｓｅｓ材料:烟用香精 32#, 二氯甲烷( ＡＲ), 乙酸苯乙酯(色谱纯,购自Ｓｉｇｍａ公司);仪 器:同时蒸馏萃取装置,手动固 相微萃取装置(美国ＳＵＰＥＬＣＯ公司),恒温水浴锅, 电子天平(精度 0.1ｍｇ,美国ＯＨＡＵ Ｓ公司), ＨＰ6890 气相 色谱议, ＨＰ6890 ＧＣ/ ＨＰ5973ＭＳ联用仪(美国惠普公司) 。 1.2 同时蒸馏萃取 / Ｓｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓｄｉｓｔｉｌｌａｔｉｏｎａｎｄｅｘｔ ｒａｃ ｔｉｏｎ按照文献[1]所述条件进行处理,即准确移取 5ｍＬ烟用香精,置于 1000ｍＬ 平底烧瓶中,加入 200 ｍＬ蒸馏水和少许沸石,该烧瓶接在同时蒸馏 萃取装置的一端,用可控 制电压的电热套进行加热;同时蒸馏萃取装置的另一端为盛有40 ｍＬ二氯甲烷的 100ｍＬ烧 瓶,该端在水浴锅上加热,水浴温度保持在 60℃。同时蒸馏萃取2 ｈ。萃取完成后,在二氯甲烷 萃取液中加入10μＬ(0.10026 ｇ/ ｍＬ) 乙酸苯乙酯( 内标),而后进行气相色谱和气相色谱/质 谱 分析。 1.3 色 质谱条件/ Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉｃａｎｄｍａｓｓｓｐｅｃｔｒｏｍｅ ｔ ｒｉｃｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ 1.3.1 色谱条件/ Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉｃｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ色谱柱: ＨＰ 5( Ｃｒｏｓｓｌｉｎｋｅｄ5% ＰＨＭＥＳｉｌｏｘａｎｅ)毛细管柱(50 ｍ×0.32ｍｍｉ. ｄ.×1.05μｍｄ. ｆ.);载气:氮气,恒流模式: 1.5ｍＬ/ ｍｉｎ;进样量:2μＬ,分流比:5 ∶1;进样口温 度:250℃;检测器( ＦＩＤ):250 ℃;氢气:40ｍＬ/ ｍｉｎ,空气: 450ｍＬ/ ｍｉｎ;程序升温:70℃ 2 ℃/ ｍｉｎ80℃3℃/ ｍｉｎ190℃10℃/ ｍｉｎ250℃(20ｍｉｎ) 。 1.3.2 色谱 质谱条件/ Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉｃａｎｄｍａｓｓｓｐｅｃ ｔｒｏ ｍｅｔｒｉｃｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ载气:氦气(纯度99.99%);其它色谱条件同上;电离方式: ＥＩ;电离能量:70 ｅＶ;传输线温度: 250℃;离子源温度:230℃;质量范围:40～550 ａｍｕ;溶剂 延迟:4ｍｉｎ;使用Ｗｉｌｅｙ谱库图谱检索进行定性。 1.4 固 相微萃取/ Ｓｏｌｉｄｐｈａｓｅｍｉｃｒｏ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ依据Ｊｅｆｆ ｒｅｙＣｌａｒｋ[3]等所做的工作采用如下条件处理样品:移取5ｍＬ香精,置于10ｍＬ样品 瓶中,加入 10μＬ(0.10026 ｇ/ ｍＬ) 乙酸苯乙酯,轻轻摇匀,盖上塞子,放入 70℃的水浴锅中 15 ｍｉｎ。将手动ＳＰＭＥ装置直接插入样品瓶中,推出涂有65μｍ厚 的聚二乙醇/二乙烯基苯 的玻璃纤维,顶空吸附30ｍｉｎ。然后将玻璃纤维插入色谱仪口中,脱附1ｍｉｎ,不分流进样, 其它色谱条件与同时蒸馏萃取的相同。 2 结果与讨论/ Ｒｅｓｕｌｔｓａｎｄｄｉｓｃｕｓｓｉｏｎｓ 2.1 处理条件的比较/ Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎｏｆｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｃｏｎｄｉ ｔｉ ｏｎｓ同样处理5ｍＬ香精, ＳＤＥ用40 ｍＬ二氯甲烷和200ｍＬ水,经2 ｈ蒸馏萃取得到香精 的萃取液;而ＳＰＭＥ是直接将纤维萃取头推入香精的顶空 气体中70℃下吸附30ｍｉｎ,然 后再将萃取头直接插入色谱仪进样口中即可,无需试剂,并节省了时间及水电。 2.2 鉴定出的香味成分比 较/ Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎｏｆａｒｏｍａｃｏｍ ｐｏｎｅｎｔ ｓｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄＳＤＥ和ＳＰＭＥ萃取的同种烟用香精的香气成分的气相色谱图 见图 1。由图1 可见, ＳＤＥ较ＳＰＭＥ多检测出3 种香味成 分( Ａ、Ｂ、Ｃ),Ｗｉｌｅｙ谱 库图谱检索结果(表1)表明,这3 种香味成分分别为