脲酶抑制法检测环境样品中重金属离子研究.pdfVIP

维普资讯 不t毛竹 2003年 第22卷 第12期 shanghai Environm ental Sciences 脲酶抑制法检测环境样品中重金属离子研究 Study on DetectingHeavyMetalIons inEnvironmentalSamplesW ith Urease InhibitionMethod 华银锋 陆贻通 (上海交通大学农业 ：境生态研究所，上海 201101) HuaYinfeng LuYitong (InstituteofAgriculturalEnvironmentalEcology,ShanghaiJiaotong University，Shanghai 201101) 摘要 为探索利用腮蔫快速检测环境样品中重金属离子的最佳条件．系统研究了重金属和缓冲液类型及其浓度对腮酶抑制率的 影响。结果表明．不同浓度缓冲液中重金属离子浓度与碌酶抑制率呈显著的相关性．表现为随着重金属离子浓度的增加．腮酶抑制率也 提高。缓冲液类型和浓度均能影响重金属对腮酶的抑制作用．其中磷酸缓冲液中．无论是Hg’还是cu’对腮酶活性均有较强的抑制作 用：在柠糠酸缓冲液中2种离子对腮酶的抑制作用存在显著差异。建立腮酶抑制检测技术的关键是选择合适的缓冲系统。此结果为腮酶 抑制法在快速检测重金属离子中最佳检测条件的选择提供了理论依据。 关键词：腮酶 抑制率 重金属 快速检测 最佳条件 缓冲液 柠檬酸缓冲液，pH6．2；ng2+~Cu2+~Cd2、Pb 标准溶液， 1 引言 上海市计量测量技术研究院提供，工作溶液以此稀释； 随着经济的快速发展，环境 中重金属污染 日益严 显色剂，苯酚一硝普盐溶液及碱性次氯酸钠溶液，根据 重，给人类的生产和健康都带来了严重的危害[1_引。建 文献[5]配制；酶标仪 (Labsystem)，芬兰产；所有化学试 立快速便捷的重金属污染检测方法，对于控制污染、保 剂均为分析纯，溶液均由去离子水配制。 护环境具有十分重要的意义。传统的重金属检测通常 2．2实验方法 采用原子吸收、溶出伏安、电感耦合等离子体光谱等技 在装有 l0 L脲酶的酶标板小孔中加入 IOOuL重 术，这些技术灵敏度高、特异性强，但存在着样品前处 金属离子样品，使两者充分接触，抑制 lOmin后，加入 理复杂、仪器费用高等缺陷。酶抑制法因具有快速、简 l0 L浓度为20mmol／L的尿素溶液启动反应20min， 便、样品需要量少等优点，受到国内外学者的关注。目 加入显色剂苯酚一硝普盐溶液及碱性次氯酸钠溶液各 前用于痕量重金属测定的常用酶有：脲酶、过氧化物 501aL，30min后，在 620nrn下测定吸光度。反应在室温 酶、黄嘌呤氧化酶、转化、葡萄糖氧化酶、丁酰胆碱脂酶 下进行，所有样品均设3次重复，并加设空白去离子水 和异柠檬酸脱氢酶等，由于脲酶廉价易得，故而使用最 为对照，以减少去离子水中可能含有的少量NH 对实 广泛 引【。 验结果产生干扰。 国内有关利用脲酶快速检测重金属离子的研究报 2．3数据处理 道较少，本文系统研究了重金属和缓冲液类型及其浓 酶活性抑制率的计算公式为： 度对脲酶抑制率的影响，以期为脲酶抑制法快速检测 c