一株具有杀松材线虫活性海洋真菌的筛选和初步鉴定.pdfVIP

第 28卷 第 2期 青 岛大 学 学报 (工 程 技 术版 ) Vo1．28NO．2 2013年 6月 JOURNALOFQINGDAOUNIVERSITY (ET) Jun．2013 文章编号 ：1006—9798(2013)02—0070—07 一 株具有杀松材线虫活性海洋真菌的 筛选和初步鉴定 徐 中强，于 洁，刘 超 ，刘晓宇，郭道森 (青岛大学生物系，山东青岛 266071) 摘要 ：为了从分离得到的海洋真菌中筛选并鉴定具有杀松材线虫活性 的菌株，本文采用 稀释涂布平板法对采 自青岛近海海域样品中的真菌进行分离 ，使用浸渍法对菌株 的培养 滤液和菌丝破碎液进行杀松材线虫活性测定 ，同时根据菌落形态 、大小、色泽等特点 的不 同，经进一步纯化得到 6个纯菌株，对这些菌株进行杀线活性测定，经初步筛选得到 2株 具有较强杀线活性的菌株，菌株 HZ一1～1处理 28h时杀线活性最高，其培养滤液和菌丝 破碎滤液的线虫校正死亡率分别达到72．6 和 84．1 ；菌株HZ 1—2处理32h时杀线 活性最高 ，其培养滤液和菌丝破碎滤液处理 的线虫校正死亡率分别为 46．3 和 58．8 。 选出活性表现最强的菌株 HZ一1—1进行后续实验 。实验结果表明，菌株 HZ一1一l为轮 枝孢属 (Verticillium)的真菌。本研究对 由松材线虫引起 的松树萎蔫病 的生物防治具有 重要的理论意义。 关键词 ：海洋真菌；筛选 ；鉴定 ；松材线虫；杀线活性 中图分类号：Q93—331；Q939．118 文献标识码 ：A 松材线虫 (Bursaphelenchusxylophilus(Steiner Buhrer)Nickle)，起源于北美洲 ，现在从亚洲的 日 本[_1]，韩 国，中国 ]到欧洲的葡萄牙_3都已见报道。松材线虫能引起松树发生一种毁灭性 的松树萎焉病 ，也 称为松材线虫病 ，其主要传播媒介是松褐天牛 (MonochamusalternatusHope)[4]。欧洲植物保护协会 已在 1985年 7月将松材线虫放在了害虫检疫名单的首位 ，并且它已经出现在 了40多个 国家的检疫名单上 ]。 在中国，该病害对松树导致的经济损失多达 25亿 ，而间接地损失要远远超过这个数 目 ]。现在 已报道的能 被松材线虫感染的松树的种类有 15种多，另外冷杉树，雪松树 ，云杉树 ，落叶松树的多个树种也有报道 [8--10]。 被松材线虫感染 的宿主植物能在 40d内死亡 ，并且在 3～5a能够毁灭周围的整个树林 。因此，松树萎焉病 被称为松树的癌症 ¨】 ]。目前 ，对松树萎焉病的防治主要是 以化学防治为主 ，但是大量使用 的化学农药造 成了持效性较差、易产生抗药性等严重问题 ，特别是化学农药对环境带来 的负面影响已逐渐被人们所认识， 因此，迫切需要研制对环境友好且高效的生物农药以取代高毒 、易污染环境的化学农药 。松树萎焉病的生物 防治已成为该病研究的一个重要发展方向，特别是对微生物源生物杀线剂的研究和利用正 日益受到重视。 M．Noritoshill13]研究发现 ，在已患病的松树上接种木霉属 (Trichoderma)的一些真菌能有效的降低松墨天牛 携带的松材线虫数量，对松树萎蔫病的传播有很好的抑制效果；雷敬超等人[1从海洋环境样品中分离和筛 选出一株链霉菌 (Streptomycessp．)，其发酵滤液稀释 10倍后仍可使松材线虫校正死亡率达到 68．9 ；郑 海营等人 口从青岛近海海域采集的样品中分离和筛选出对松材线虫具有较强杀线活性 的 2株巨大芽孢杆 菌 (Bacillusmegaterium)；MengQingHeng等人[]报道 了一株具有较强杀松材线虫活性 的海洋真菌 收稿 日期 ：2013—01—11 基金项 目：青岛市科技发展计划项 目(12—1—4—2一(1)一Jch) 作者简介 ：徐中强 (1987一)，男 ，湖北宜都人，硕士研究生 ，主要研究方 向为海洋微生物资源的开发与利用 。 通讯作者 ：郭道森，教授 ，硕导 。Email：guodaosen@