几种提取液对苹果成熟叶片总RNA提取质量的影响.pdfVIP

安徽农业科学，JournalofAnhuiAgriSci．2011，39(5)：2570—2571。2607 责任编辑 张彩丽 责任校对 况玲玲 几种提取液对苹果成熟叶片总 RNA提取质量的影响 曹晓凤，邵建柱，予J、建设 (河北农业大学园艺学院，河北保定o71ooo) 摘要 [目的]筛选一种快速有效地提取高质量的苹果成熟叶片总RNA的提取液。[方法]以红富士苹果成熟叶片为材料，用3种不同 的提取液提取苹果成熟叶片的总RNA，并通过分光光度计、琼脂糖凝胶电泳和RT—RCR检测RNA质量。[结果]3种试剂中2种可以提 取出总RNA。 结论]用RNAiso—mateforP1antTiSSU和RNAisoPlus搭配使用和RNAisoforPolysaccharide—richP1antTissue单独使用均可 提取出质量较好的RNA，前者质量优于后者。 关键词 苹果；成熟叶片；总RNA；提取液 中图分类号 S661．1 文献标识码 A 文章编号 O517—6611(2011)05—02570—02 Effect0fThreeExtractSolutionsonTotalRNAQualityExtractedfrom MatureAppleLeaves CA0Xiao-fengetaI (CollegeofHorticulture，HebeiAgricultura1University，Baoding，Hebei071000) Abstract IObjectivelThestudywasconductedtoscreenafastandeffieientextractsolutionofrtotalRNAextractionfrommatureappleleav． es．JMethod{ThreeextractsolutionswereusedofrRNAextraction，andRNAwasdetectedbyspectrophotometerandagarosegelelectrophore— sis，andevaluatedbyRT—PCR．1ResuhITWoofthethreeextractsweresuitablefortotalRNAextractionfrommatureappleleaves．[Conclu— sionlTheRNAiso—mateforP1antTissuecombinedwithRNAisoPlus，andRNAisoforPolysaccharide—richPlantTissueweresuitableforhigh qualityRNA extractionrfOH matureappleleaves，buttheforraersolutionwasbetterthanthelatter Keywords Apple：Matureleaves：TotalRNA：Extraction 纯度高、完整性好的总 RNA是进行分子生物学研究的 (2)方法A：取上清液，加入 100Ixl氯仿剧烈振荡 15s。 基础。苹果成熟组织中含有大量多酚和多糖化合物 ，酚类化 待溶液充分乳化后 ，室温静置5min。方法B：取上清液 ，加入 合物被氧化后会与 RNA不可逆地结合 ，多糖会形成难溶的 100txl的5mol／LNaC1和350Ixl的氯仿。剧烈振荡，溶液充 胶状物，与RNA共沉淀下来，多数常规的核酸提取方法则不 分乳化后，室温静置5min。方法C：取上清液，平均分至2个 能有效地去除。。已有报道对芒果 、葡萄 、白刺 、棉 新的1．5ml离心管中，每管加500txl的RNAisoPlus，充分振 花 、百脉根 和木薯块根 等多糖多酚植物组织总 RNA 荡，室温静置5min。加入250ILl氯仿剧烈振荡 15s，室温静 的提取方法进行了研究。从苹果组织中提取总 RNA多采用 置 5min。 CTAB法和 SDS法 。该研究以3种商品化提取液为试 (3)4℃、120O0r／min离心 15min，取上清液。 材，从苹果成熟叶片中提取 RNA，以期筛选 出一种快速有效 (4)方法A、c：加等体积