13RNA的生物合成.ppt

依赖Rho (ρ)因子的转录终止 非依赖Rho因子的转录终止 帽子结构 5? pppGp… 5? GpppGp… pppG ppi 鸟苷酸转移酶 5? m7GpppGp… 甲基转移酶 SAM 帽子结构的生成 5? ppGp… 磷酸酶 Pi 3’端加多聚腺苷酸尾结构 * 目 录 * 目 录 RNA的生物合成 （转录） RNA Biosynthesis, Transcription 转录 (transcription) 生物体以DNA为模板合成RNA的过程 。 转录 RNA DNA 复制和转录的区别 参与转录的物质 原料: NTP (ATP, UTP, GTP, CTP) 模板: DNA 酶: RNA聚合酶(RNA polymerase, RNA-pol) 其他蛋白质因子 模板和酶 Templates and Enzymes 一、转录模板 DNA双链中按碱基配对规律能指引转录生成RNA的一股单链，称为模板链(template strand)，也称作反义链(antisence strand)。相对的另一股单链是编码链(coding strand)，也称为有意义链。 5′···GCAGTACATGTC ···3′ 3′··· c g t c a t g t a c a g ···5′ 5′···GCAGUACAUGUC ···3′ N······Ala · Val · His · Val ······C 编码链 模板链 mRNA 蛋白质 转录 翻译 5? 3? 3? 5? 模板链 编码链 编码链 模板链 结构基因 转录方向 转录方向 不对称转录(asymmetric transcription) 在DNA分子双链上某一区段，一股链用作模板指引转录，另一股链不转录 ； 模板链并非永远在同一条单链上。 二、RNA聚合酶 （一）原核生物的RNA聚合酶 核心酶 (core enzyme) 全酶 (holoenzyme) ?? ? ? ? ? ?? ? ? ? 原核RNA聚合酶 RNA聚合酶由5个亚基构成，α2ββσ为全酶， α2ββ为核心酶。 RNA聚合酶全酶在转录起始区的结合 转录过程 The Process of Transcription （一）转录起始 转录起始需解决两个问题： RNA聚合酶必须准确地结合在转录模板的起始区域。 DNA双链解开，使其中的一条链作为转录的模板。 一、原核生物的转录过程 2. DNA双链解开 1. RNA聚合酶全酶(?2????)与模板结合 3. 在RNA聚合酶作用下发生第一次聚合反应，形成转录起始复合物 RNApol (?2????) - DNA - pppGpN- OH 3? 转录起始复合物: 5?-pppG -OH + NTP ? 5?-pppGpN - OH 3? + ppi 转录起始过程 （二）转录延长 1. ?亚基脱落，RNA–pol聚合酶核心酶变构，与模板结合松弛，沿着DNA模板前移； 2. 在核心酶作用下，NTP不断聚合，RNA链不断延长。 (NMP) n + NTP ?? (NMP) n+1 + PPi 转录空泡(transcription bubble)： RNA-pol （核心酶） ···· DNA ···· RNA 目 录 3’ 5’ 目 录 5? 3? DNA 原核生物转录过程中的羽毛状现象 核糖体 RNA RNA聚合酶 （三）转录终止 指RNA聚合酶在DNA模板上停顿下来不再前进，转录产物RNA链从转录复合物上脱落下来。 分类 二、真核生物的转录起始 （一）转录起始 真核生物的转录起始上游区段比原核生物多样化，转录起始时，RNA-pol不直接结合模板，其起始过程比原核生物复杂。 真核生物的RNA聚合酶分三类 RNA聚合酶Ⅰ: 存在于核仁中，转录rRNA RNA聚合酶Ⅱ: 存在于核质中，转录大多数基因， RNA聚合酶Ⅲ: 存在于核质中，转录很少几种基因如 tRNA基因如5SrRNA基因。 转录起始点 TATA盒 CAAT盒 GC盒 增强子 顺式作用元件(cis-acting element) 1. 转录起始前的上游区段 AATAAA 切离加尾 转录终止点 修饰点 外显子 翻译起始点 内含子 OCT-1 OCT-1：ATTTGCAT八聚体 参与RNA-polⅡ转录的TFⅡ 2. 转录因子(transcriptional factors, TF) 3. 转录起始前复合物(pre-initiation complex, PIC) 真核生物RNA-pol不与DNA分子直