色谱定性定量方法郭春海 研究员 gchab@com.ppt

内标法优缺点 优点：定量准确，对试样含有不出峰的组分情况下，也不影响测定。 缺点：每次测定都必须准确称取样品和内标物质量，不适于快速分析。 9. 常用的几种定量测定方法（七） 内标曲线法 若以 Ci % 对 Ai / As作图，则可得一条通过原点的直线——内标标准曲线。 为一常数，上式则可化为： x i % = 用内标法待测组分含量计算式 x i = 若固定试样称取量，加入内标物也恒定，则有： 9. 常用的几种定量测定方法（七） 内标标准曲线的绘制 将待测组分的纯物质配成不同浓度的标准溶液（系列）； b. 取固定量的标准溶液和内标物，混合后进样分析，测出 Ai 和 As； c. 用 Ai / As 对标准溶液浓度作图，可得一组通过原点的直线（内标标准曲线）。 9. 常用的几种定量测定方法（八） 样品测定与组分定量 称取与绘制标准曲线相同量的试样和内标物，测出其峰面积比，由标准曲线即可查出待测组分的含量。 内标标准曲线法应用在生产过程控制分析上，不须计算校正因子，对液体样品也可量取体积，具有简便快速的特点。 9. 常用的几种定量测定方法（九） 外标标准曲线法 a. 取被测组分的纯物质，配制成一系列不同浓度的标准溶液； b. 分别取一定体积上述溶液注入色谱柱； c. 得到色谱图后测出峰面积或峰高； d. 绘出峰面积（或峰高）对浓度的关系曲线——（标准曲线）。 A. 标准曲线的绘制： 9. 常用的几种定量测定方法（十） 外标法 样品测定 在同样操作条件下注入同样量（一般为体积）的未知试样，从色谱柱上测得峰面积或峰高，在标准曲线上即可查出待测组分的浓度。 外标法也用于生产过程的控制分析，操作简便，计算简单，但分析结果准确性取决于操作条件的稳定性和进样的重现性。 9. 常用的几种定量测定方法（十） 外标法 样品测定（二） 当试样中待测组分浓度变化不大时，可不必作标准曲线，而用单点校正法。即配制一个与被测组分含量接近的标准样，分别取相同量体积进样，测定标准样和未知样的峰面积，按下式计算组分含量: Ci% = Ai/As ×Cs% 9. 常用的几种定量测定方法（十一） 标准加入法（一） 标准加入法实质上是一种特殊的内标法，以欲测组分的纯物质加入到待测样品中，分别测定加入前后的峰面积，从而计算欲测组分在样品中的含量。 可以单点加入，色谱条件完全相同的情况下，按以下公式计算： 9. 常用的几种定量测定方法（十二） 标准加入法（二） 可以加入一系列浓度，按标准曲线外推法计算出欲测物在样品中的含量。 优点：不需要另外的内标物，不必要进样非常准确；操作简单；若在前处理过程加入，可补偿被测组分在处理过程中的损失。 缺点：色谱条件要求完全一致，否则会带来分析误差。 9. 常用的几种定量测定方法（十三） 标准加入法（三） ① 将一系列已知量待测物分别加入到几等份的样品中，配制成浓度为(cx+0), (cx+c1), (cx+c2), (cx+c3)…….. 和样品有相同基体的标准系列溶液(加标，spiking)； ② 通过仪器分别测量以上系列溶液的响应值S0，S1，S2，S3，S4……； ③以响应信号S对浓度c作图，再将直线外推与浓度轴相交于一点(下图)，求得样品中待测物浓度cx。 cx 0.0 0.2 0.0 10 20 30 -10 浓度，c S S2 S3 S4 S1 0.4 0.6 0.8 1.0 1.2 ? 当样品量很少时，可在一份样品中加标，加一次作一次测量，可得到上述 方法相同的结果； ? 当觉得上述过程麻烦时，可只加标一次，分别测量样品和加标样品的仪器 响应，再直接通过公式进行计算。 优点：基体(matrix)相近，或者说基体干扰相同； 缺点：麻烦，适于小数量的样品分析。 10 影响定量准确度的因素 1、样品制备 --衍生化成可气化的或有紫外吸收或带荧光的，转化率要高 --溶剂 --样品回收率 --样品溶液的贮存 2、进样技术 --人员手动进样 --进样装置的准确性 3、色谱条件变化—柱温（气相）、流动相组成（液相）；柱效对峰高有影响，峰面积无影响（保证分离度的情况下） 4、检测器特性：线性范围和稳定性、特殊组分使用选择性检测器 5、分离度 谢谢！ * 在此 * 在此 色谱定性定量方法郭春海 研究员 gch-ab@163.com 1 有关色谱峰的基本概念（一） 1 有关色谱峰的基本概念（二） 峰底(CD) 峰高(h) 峰宽(KL) 半高峰宽(W1/2) 峰面积（A） 拖尾峰（Tailing peak） 前伸峰（Leading peak） 基线（Baseline) 基