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慢病毒载体介导IL24基因转导人骨髓间充质干细胞的实验研究.pdf
生圈堕疸苤查!!!i生!旦筮!!鲞笙!塑曼!!!!兰!!g曼!!!垫』!!!!!z!!!i：塑!：!!!塑!：! ·7·
DOI：10．3779／j．issn．1009-3419．2013．01．02 基础研究
慢病毒载体介导儿一24基因转导人骨髓间充质
干细胞的实验研究
祁秋干周清华李印李伟强陈霏秦建军
bonemarrow stem
cells，hBMSCs)作为抑癌基
【摘要】背景与目的以人骨髓间充质干细胞(human mesenchymal
fluorescent
因见一24的细胞载体的研究目前未见报道。应用Gateway法构建共表达增强型绿色荧光蛋白(enhancedgreen
protein，EGFP)基因和儿．24基因的慢病毒载体，探讨其X寸hBMSCs的转导情况，为今后肿瘤的基因治疗奠定基础。
Mix)共转染293FT2m胞，收集上清，纯化浓缩，测定重组病毒的滴度。取重组慢病毒感染hBMSCs，通过
Packaging
嘌呤霉素筛选并纯化hBMSCs，应用实时荧光定量PCR(quantitative
mRNA及IL一24蛋白水平的表达情况。结果成功构建了共表达儿一24和EGFP基因的重组慢病毒载体，经包装、纯化及
浓缩，病毒滴度为7．25x107PFU／mL。重组慢病毒转导hBMSCs后，通过筛选获得纯化，转导效率可达到100％÷qPCR
检测示：转导组IL．24
达40
Fg／L，未转导组为阴性。结论构建的携带／L．24基因的重组慢病毒载体可有效转导hBMSCs，表达IL一24蛋白：
【关键词】人骨髓间充质干细胞；IL一24；EGFP；基因转导；慢病毒载体
【中图分类号】R734．2
inHumanBoneMaITOW Stem
onTransductionof／L．24Gene
Study Mesenchymal
CellsLentiviralVector
by
ZHOUl，Yin L13，Fei 03N2
Qiugan031…，Qjnghua L12，WeiqiangCHEN3,Jianjun
1 CancerMetastasisandTumor Cancer Medi-
Institut6
TianjinKeyLaboratoryosLung Microenvironment,TianjinLung Tianjin
cal General Thoracic Henanj
03 Hosp
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