藿香对高温应激引起的IEC-6细胞凋亡的调控.pdfVIP

中因畜牧善医学会中兽医学分会2011年学术年会论文集 灭菌干净的盖玻片放八六孔板中，再加入传代的细胞，37C，5％C02中培养，待细胞贴满板底的 I I配成的终浓度为I％染液上，避光染色】0mln，荧光显微镜下照相．AO用蓝色激发光发显示绿色． EB用绿色激发光显示红色，后期做图像叠加处理。 2．4流式细胞仪检测细胞调亡奉 x 高温刺激后胰酶消化收取细胞值日胞自细胞培养板中取出后，收入I5mL离心管中2000rpm5rain Iodide，混匀，室温下避光反应15min。使用未经凋亡诱导处理的 V-FITC混匀后，加入5山Propidium 细胞作为对照，进行荧光补偿的调节，激发波长Ex--488nm；发射波长Em-530／)m，流式细胞仪检测． 用Multicycle软件分析细胞凋亡状态。计算早期和晚期细胞凋亡率(％)。 2．5RT-PCR检涓凋亡基因 将处理后的细胞，弃去培养基并用PBS冲洗2次，采用Trizol(1nvitrogen,Life