西伯利亚鲟细菌性败血症病原菌的分离鉴定和药敏试验.pdfVIP

江苏农业科学 2012年第40卷第5期 一 197一 张荣先，先大强，游国辉，等．西伯利亚鲟细菌性败血症病原菌的分离鉴定和药敏试验[J]．江苏农业科学，2012，40(5)：197—199 西伯利亚鲟细菌性败血症病原菌的分离鉴定 和药敏试验 张荣先，黄雪飞，先大强，游国辉 (铜仁职业技术学院生物工程系，贵州铜仁 554300) 摘要：从患典型细菌性败血症的西伯利亚鲟的肝、肾中分离到病原菌，经人工感染试验证明对健康鲟具有较强致 病性 ，死亡率可达 100％，而且症状与 自然发病鲟相同。通过形态学、生理生化试验，证实引起西比利亚鲟败血症的病 原菌为嗜水气单胞菌。药物敏感性试验结果显示：分离到的病原菌对头孢噻吩、头孢唑啉、头孢克洛、庆大霉素、硫酸 链霉素、氧氟沙星、阿米卡星、妥布霉素、环丙沙星、磺胺嘧啶和哌拉西林都敏感，而对氨苄西林和四环素不敏感。 关键词：西伯利亚鲟；细菌性败血症；嗜水气单胞菌 ；药敏试验 中图分类号：$941．42 文献标志码：A 文章编号：1002—1302(2012)05—0197—02 西伯利亚鲟 (Ac~ertserbaeni)是一种大型淡水经济鱼类， 尾鲟鱼体注射0．2mL的菌悬液。各种处理分别设对照组，浸 也是世界上最珍贵的淡水鱼类之一。因其具有生长速度快、 泡感染和创伤感染的对照组分别浸泡等量的无菌生理盐水； 适应性强、营养丰富、肉质鲜美、鱼子酱品质高等优点，因此具 肌肉注射的对照组则是进行肌 肉注射0．2mL的生理盐水。 有很高的经济价值和营养价值 。近年来 ，在全国各地的鲟 每组各置于水族玻璃缸 (100cm×50cm×60cm)里饲养 ，每 鱼出血性败血症大面积暴发，该病发病率和死亡率都很高，病 天正常投喂专用饲料，水温控制在25oC，日换水量约1／2，观 鱼体表大面积充血，腹部肿胀 ，剖检后腹腔内有大量腹水，肠 察并记录结果。 道充血或出血，肝脏有出血点，脾脏发生实质性出血病变。本 1．3 病原茵的再分离和鉴定 研究从贵州某鲟鱼养殖场患出血性败血症鲟鱼的肝、肾分离 病原菌的分离采用 “1．1”的分离方法。将分离菌株接种 病菌，并进行人工感染试验，从形态学、生理生化等方面对分 于普通营养琼脂培养基平板上，28℃培养 18—24h，观察在 离的病原菌进行了鉴定和药物敏感试验 ，为西伯利亚鲟细菌 普通营养琼脂培养基上的菌落形态 ，并观察细菌形态，进行生 性败血症的有效预防和治疗提供参考。 理生化鉴定。 1．4 药物敏感性试验 1 材料与方法 将病原菌接种于普通营养琼脂培养基平板上，28℃培养 1．1 典型病鱼的采集与病原菌的分离 18～24h，采用滤纸片法做抑菌试验。滤纸片扩散法：参照 具有典型的出血性败血症的病鱼采于贵州省某鲟鱼养殖 NCCLS抗生素敏感试验操作标准及相关研究文献 进行。 场 ，经体表消毒后，在无菌条件下从具有典型的出血性败血症 先用无菌生理盐水洗脱于斜面培养基上28℃培养 18—24h 的病鱼的肝、肾处取样，普通细菌营养琼脂培养基划线分离， 的菌 苔，再 用 无 菌 生 理 盐 水 调 至菌 悬 液 浓 度 为 28℃培养 18～24h，取若干形态均一的菌落接种于液体营养 1．5×10CFU／mL，然后将其均匀涂布于营养琼脂培养基上 培养基中。 (选用直径为9．0cm的培养皿)，每个培养皿 的接种量为 1．2 病原菌的人工感染试验 100 ，涂布后盖好培养皿 ，25℃培养箱中放置 15min左右， 1．2．1 菌悬液的制备 试验用菌株在28℃培养 18