BALB_c小鼠选择与腹水产量和抗体效价间关系的研究.pdfVIP

第 25 卷 　第 6 期 实验动物科学 Vol . 25 　No . 6 2008 年 12 月 LABORATORY ANIMAL SCIENCE December 2008 研究 ·论著 BALBc 小鼠选择与腹水产量和抗体效价间关系的研究 杜春红 　钟佑宏 　陈　平 　尹家祥 　石丽媛 　于国林 ( 云南省地方病防治所 云南大理 　671000) 摘要 : 目的　观察在鼠疫 F1 单克隆抗体制备过程中 ,BALBc 小鼠的选择和饲养与所获腹水量和抗体效价的关系 , 为大量制备该单克隆抗体提供实验室参考依据 。方法 　根据小鼠周龄 、性别和饲养条件对 BALBc 小鼠进行分组 , 并采用动物体内诱生法制备腹水 ,间接 ELISA 用来检测腹水中 F1 单克隆抗体效价 。结果 　12～16 周龄组 、雄性和 加强营养组小鼠所获腹水产量和效价均高于其它周龄组和对照组 。结论 　选择适当周龄的雄性小鼠、饲养过程中 加强营养和管理可适当提高腹水产量和抗体的效价 。 关键词 : F1 单克隆抗体 ;BALBc 小鼠; 腹水 ( ) 中图分类号 : Q95433 　　文献标识码 :A 　　文章编号 :1006 - 6179 2008 　　杂交瘤细胞克隆化成功后 ,便可进行大规模培 株 ,其抗体亚型分别为 : IgG 、IgG 、IgG ,轻链均为 κ 3 2a 1 养 , 以制备大量的单克隆抗体 。目前较常采用的方 链[3 ,4 ] 。 法是体外培养法和动物体内诱生法 。体外培养法培 12 　实验动物 养液上清中含较高浓度抗体时 ,勿需太多纯化即能 根据杂交瘤建立时选用的是 SP20 小鼠骨髓瘤 满足实验室需要 ,但无血清培养成本较高 ,且需具备 细胞 ,其来源是BALBc 小鼠,故选用BALBc 小鼠制 相应的设备 。而将杂交瘤接种于小鼠腹腔中可诱导 备腹水 。动物购 自昆明医学院实验动物中心 ,许可 ( ) 产生大量腹水 , 同时分泌大量抗体于腹水中 ,其浓度 证号 :SCXK 滇。 较高 。该法是 目前实验室常用的抗体制备方法之 13 　杂交瘤细胞悬液 一[ 1] 。 用弯头吸管以无菌 RPMI 1640 轻轻冲下处于生 课题组因工作需要对融合成功 、能稳定分泌鼠 长旺盛期的杂交瘤细胞 ,移入离心管 , 1000 rmin 离 疫 F1 单克隆抗体的杂交瘤细胞株[2 ] ,采用腹腔接种 心 5 min ,弃上清 ,加入无菌生理盐水 ,充分混匀 ,制 5 6 动物体内诱生法制备单克隆抗体 。在腹水制备过程 成浓度为 2 ×10 ～10 mL 的细胞悬液 , 临用时制 中 ,对不同性别 、周龄和饲养条件下的小鼠所采集到