Bcl2短发夹状RNA对NB4细胞株生长的抑制作用.pdfVIP

维普资讯 2006年第 巷 22朝 中国肿瘤 临床 277 Bcl一2短发夹状 RNA对 NB4细胞株生长的抑制作用 摘要 目的 ：构 建 Bcl_2短发夹杜 R、Alsh,irlIlaiI11mRNA．shRNA)序刮的表运载俸并研究#叶早时枉 白血病 细胞株 NB4生长的柳制蚌 用 方法 ：针对 l{I-I一2基因构 建编码 shRNA序列的章蛆 是速战体 ．垃酶切 电永和 )『NA剥 序鉴定 采用脂 质催介 导的转 染方法碍重蛆的 RNAi贡枉砖 ^ NB4细胞后 ．通过荧光显撒镜 和流矗抽抱仪观察 特染 蛀章．囊用WesternBbl检测Bcl一2蛋白表达 水平 ；采用MTT法l剥定宝田胞增殖青}把 结果 ：编码B-1一 hl{NA的H ^ 序列被 正璃地插 八到预期 位．最 特 两十 I 2 1iR A栽体 分别转 八 B4如抱后 ．卧 一【2蛋白表达 水平均降慨 与转 染阴性 shRNA受未转染组 比较 ，均有 显著性 差异 (PO．05)转 染 B(1—2sf1RNA1、stlRNA2栽体凡 It4如胞在 72、961l 细胞生长明显受到押书】．分新与转染 陌}生shRNA 生纯载 I奉组厦耒蟾染姐比较 ，差弄有显著性cP005) 结论 ：蜘连 的两十 Bcl一2shRNA均可特异性地押制 Nl；4细l胞生长 关键词 B I一2 shRNA IINAi NB4如 咆 中固分 类号 ：R551．3 文献标 识码：A 文章编号 ：l000—8I79(2006)22—1277—04 InhibitoryEffectofBcl——2ShortHairpin RNA on theGrowth ofNB4CelILine He1)ongnwi ZIlaltgHuan Liu (Pxiu tn,~titutetqlitnlmt} yJimm Unit’ersfryMedic。fdCotb ，Guan~zbou AbstractObjective：T_lrotl~tfuelexpressing ¨[1rolsh0九hai@i~1RNAfshRN^1targetingB(。l一 2．and inv,sligat~ theI1m-(l·c,fBel-2sltRNAs·lIlllu growlh ¨fac。LIt[pmm)ek．)Lit ukemia e‘‘llI…I- NB4 M ethods：Reo【mlJinante~pn~ssion v州lI)rPxpressing IjI-I一2 shRNAsw孙 iih,Ill[fleeI1．、 I1z～I11I· cuLLingand ：．,equeH(。ing anal3．sis．B 一2 shRNAsW(~reIransf~·‘lhllo NB4 ㈩ llwit}i1．ip．G ami∽ Trall~,fecl·tt-flIsWere vjsualjsP·{usirig tlVelLe(II1i1~irescellltriJcn，scI【pe a1『·t_ll(~flassa~-·(II)v h【，w cylonmtr)rTheexpression 【vPls [1rBcl一2proteinwerPassayelI】 W q~rll—blot．Cvh)loxiceffet：lswere mta,tlrrfj1]v |lSf-nfⅥFrlllelhod Resuits：Enzymemitringandz~eqUelleings]／owe~1thattheinserliq·lI SeCltl#- ewas “irr~·n W sleln—bh,II／SS~I％shc}wec【Ihatthe·explt~ssiOllIevels[1lB(．1—2proteii1Iroli1N