STAT3和CyclinD1蛋白在乳腺癌中的表达及意义.pdfVIP

山东医药 2010年第 50卷第 52期 STAT3和 CyclinD1蛋 白在乳腺癌 中的 表达及意义 齐凤杰 ，赵树鹏 ，朱 培 (1辽宁医学院，辽宁锦州 121001；2辽宁医学院附属一院) 摘要 ：目的 探讨信号传导及转录活化 因子 3(STAT3)和细胞周期蛋 白Dl(CyclinD1)在乳腺癌发生、发展 中的 作用 ，分析其与患者临床病理特征及预后的关系，为乳腺癌的治疗 、预后提供有价值的生物学标志。方法 应用免 疫组化PV-9000两步法检测 80例乳腺癌和3O例乳腺 良性病变患者术后石蜡标本中STAT3和 CyclinD1蛋 白的表达 情况 ；Westernblot技术检测 STA~在乳腺癌细胞株MCF一7和BT474中蛋 白表达水平。结果 乳腺癌组织中STAT3 和 CyclinD1蛋 白的阳性表达率均高于乳腺 良性病变组织 (P0．05)；STAT3和 CyclinD1蛋 白的表达均与腋窝淋巴结 转移 、TNM分期及组织分级密切相关 (P0．05)，与患者年龄、肿瘤大小 、雌激素及孕激素受体状况无关 (P0．05)。 在浸润性乳腺癌组织中STAT3和 CyclinD1蛋 白表达呈正相关 (r：0．646、P=0．000)。乳腺癌患者 STAT3和 Cy— clinD1蛋白阳性表达组总生存期 (OS)、疾病进展时间(1TrP)的值均低于阴性表达组(P0．05)。STAT3在BT474中 的蛋 白表达量是MCF一7的2．8832倍 ，差异亦有显著性。结论 STAT3和CyclinD1蛋 白与浸润性乳腺癌的进展存在 一 定相关性，检测二者的表达可对浸润性乳腺癌的治疗及判断预后提供理论依据。 关键词：乳腺肿瘤 ；信号传导及转录活化因子 3；细胞周期蛋 白D1；预后 中图分类号：R730．5 文献标志码 ：B 文章编号：1002—266X(2010)52 106_03 近年来乳腺癌的发病率在世界范围内呈持续上 1．2 主要试剂 兔抗人 STAT3单克隆抗体及兔抗 升趋势 ¨J，发病机制 尚不清楚。信号传导及转录活 人 CyclinD1单克隆抗体购 自福建迈新公司，PV． 化因子3(STAT3)是一种重要的核转录因子，参与 9000检测试剂盒及 DAB显色试剂盒购于北京 中杉 调控细胞 的生长 、分化、增生、恶性转化及凋亡抑 金桥公司。 制 J。细胞周期蛋 白D1(CyclinD1)为 STAT3细 1．3 免疫组织化学 sP法 采用免疫组织化学 PV- 胞信号传导的下游分子，可参与细胞周期的精确调 9000两步法。切片厚4 m，脱蜡至水。置于 3％ 控，引起细胞生长失控 、转化和癌变。有关 STAT3 H，O，内10min灭活内源性过氧化物酶。抗原热修 和 CyclinD1蛋白表达在乳腺癌发生 、发展及预后判 复后 自然冷却，滴加一抗4℃冰箱过夜；PBS液冲洗 断的研究 尚少见报道。本研究 旨在探讨二者在乳腺 2min×3次 ，滴加试剂 1，37oC温箱内孵育20min； 癌中的表达及临床意义。 PBS液冲洗 2min×3次，滴加试剂 2，37oC温箱 内 1 材料与方法 孵育30min；PBS液冲洗 2min×3次，DAB显色 ，蒸 1．1 材料 选择2003年 1月 ～2005年 l2月在辽 馏水冲洗、苏木精复染、乙醇脱水、二甲苯透明、中性 宁医学院第一附属医院手术治疗并具有随访资料的 树脂封片。每批均设 已知阳性切片作对照，用 PBS 乳腺癌石蜡包埋组织 80例 ，年龄 26～66岁 、中位年 缓冲液代替一抗作阴性对照。 龄46岁 ，所有患者术前未进行任何抗癌治疗。按 1．4 细胞株的传代培养 MCF-7和 BT474人乳腺 UICC2003年TNM分期 ：I～Ⅱ期 54例 、Ⅲ ～Ⅳ期